Anticorpo policlonale anti-GABRA5 per WB, ELISA - P31644

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GABRA5

• La subunità alfa-5 del recettore dell'acido gamma-aminobutirrico (subunità alfa-5 del recettore GABA(A)), codificata dal gene GABRA5, è una proteina integrale di membrana che costituisce la subunità alfa del canale del cloro GABA-dipendente eteropentamerico. Riferimenti correlati: PMID:14993607, PMID:29961870, PMID:30140029
• I recettori GABA(A) (GABAAR) sono assemblati a partire da cinque subunità disposte attorno a un poro centrale, con i siti di legame del GABA localizzati all'interfaccia tra le subunità alfa e beta. Riferimenti correlati: PMID:30140029
• In seguito al legame del GABA, i GABAAR contenenti GABRA5 facilitano l'afflusso selettivo di ioni cloruro attraverso la membrana postsinaptica, provocando iperpolarizzazione neuronale e inibizione della neurotrasmissione. Riferimenti correlati: PMID:14993607, PMID:30140029
• Le subunità GABRA5 sono localizzate prevalentemente in siti extrasinaptici dell'ippocampo, dove mediano l'inibizione GABAergica tonica e contribuiscono a processi cognitivi quali apprendimento e memoria.
• La subunità è una glicoproteina con formazione di ponti disolfuro nel dominio extracellulare e subisce modifiche post-traduzionali, inclusa l'ubiquitinazione (coniugazione Ubl).
• Le mutazioni in GABRA5 sono associate a encefalopatia dello sviluppo ed epilettica (DEE79, EIEE79), sottolineandone il ruolo critico nella funzione neurologica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la regione extracellulare N-terminale (aa 32-259) di GABRA5 umano, consentendo il riconoscimento delle conformazioni proteiche native e denaturate; verificare le prestazioni nel proprio specifico sistema di analisi.
• Per il Western blot, si raccomandano lisati di tessuto cerebrale, in particolare dell'ippocampo, come controlli positivi grazie all'elevata espressione di GABRA5.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare l'immunogeno proteico ricombinante come standard di riferimento per valutare il legame dell'anticorpo.
• È riportata la reattività crociata con GABRA5 di topo e ratto; valutare la verifica dell'allineamento delle sequenze se si utilizzano queste specie.
• Poiché GABRA5 è una proteina transmembrana, possono essere necessari protocolli ottimizzati di lisi e preparazione dei campioni per un'estrazione efficiente.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando il knockdown mediante siRNA, tessuto knockout o controlli con peptide bloccante per escludere il legame fuori bersaglio.

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