Anticorpo policlonale di coniglio Anti-GABRA5 per WB e ELISA - P31644

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GABRA5

• GABRA5 codifica la subunità alfa-5 del recettore GABA(A), un canale al cloro ligand-dipendente eteropentamerico che media la neurotrasmissione inibitoria rapida nel cervello. Riferimenti bibliografici: PMID:14993607 PMID:29961870 PMID:30140029

• I recettori GABA(A) si assemblano come pentameri attorno a un poro centrale, con il sito di legame per il GABA formato all'interfaccia tra le subunità alfa e beta. Riferimenti bibliografici: PMID:30140029

• Dopo l'attivazione da parte del GABA, i recettori contenenti GABRA5 permettono selettivamente il flusso di ioni cloruro attraverso la membrana, determinando l'iperpolarizzazione postsinaptica. Riferimenti bibliografici: PMID:14993607 PMID:30140029

• I recettori che contengono GABRA5 sono prevalentemente extrasinaptici e rappresentano mediatori chiave dell'inibizione GABAergica tonica nell'ippocampo.

• I GABAAR extrasinaptici contenenti la subunità alfa-5 presenti nei neuroni piramidali della CA1 sono coinvolti in modo critico nei processi di apprendimento e memoria.

• La proteina si localizza sulla membrana cellulare postsinaptica e sulla membrana cellulare generale, coerente con il suo ruolo nella segnalazione sinaptica ed extrasinaptica.

• Le mutazioni nel gene GABRA5 sono associate all'encefalopatia epilettica e dello sviluppo (DEE79/EIEE79), evidenziando la sua importanza clinica nelle malattie neurologiche.

• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di legami disolfuro e ubiquitinazione, che possono regolare il traffico e la stabilità del recettore.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 32–259, che coprono la maggior parte del dominio N-terminale extracellulare; questa regione contiene epitopi critici per il riconoscimento specifico della subunità.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 52 kDa; convalidare la specificità utilizzando lisati di controllo positivi e negativi appropriati (ad esempio tessuto cerebrale da modelli wild-type rispetto a modelli knockout per GABRA5).
• La reattività crociata con le specie topo e ratto permette studi traslazionali; confermare le prestazioni nel tessuto bersaglio e nel tipo di esperimento prima dell'utilizzo su larga scala.
• In ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo per la cattura o la rilevazione di GABRA5 ricombinante; potrebbe essere necessario abbinarlo a un anticorpo di rilevazione compatibile o effettuare un marcatura diretta.
• Le condizioni di tampone e bloccaggio devono essere ottimizzate empiricamente, in particolare per la rilevazione di proteine di membrana; evitare condizioni denaturanti severe che possono danneggiare gli epitopi conformazionali.

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