Anticorpo policlonale di coniglio anti-GAD65/GAD2 per WB, IF-P, ELISA - Q05329

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GAD65/GAD2

• La glutammato decarbossilasi 2 (GAD2), nota anche come GAD-65 o glutammato decarbossilasi da 65 kDa, è un enzima dipendente dal piridossal fosfato che catalizza la conversione del glutammato in GABA.
• GAD65 è essenziale per la sintesi del principale neurotrasmettitore inibitorio GABA nel sistema nervoso centrale, modulando l'eccitabilità neuronale e la trasmissione sinaptica.
• La proteina si trova nel citoplasma e si associa alle membrane dell'apparato di Golgi, delle vescicole citoplasmatiche e della membrana cellulare presinaptica.
• Le modifiche post-traduzionali includono palmitoilazione e fosforilazione, fondamentali per il targeting subcellulare e la regolazione dell'attività enzimatica.
• In quanto proteina di membrana periferica, GAD65 alterna stati citosolici e legati alla membrana, un processo associato alla dinamica delle vescicole sinaptiche.
• Coerentemente con il suo ruolo nella neurotrasmissione, GAD65 è espressa principalmente nei neuroni GABAergici.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la regione C-terminale (aa 401-585) di GAD65 umano, che probabilmente contiene epitopi conservati, in linea con la reattività crociata riportata verso topo e ratto.
• Per il Western blot, prevedere una banda a circa 65 kDa; prendere in considerazione l'uso di lisati di tessuto cerebrale o di linee cellulari neuronali note per esprimere GAD65.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), permeabilizzare le cellule per rilevare sia le frazioni citoplasmatiche sia quelle associate alla membrana; la co-colorazione con marcatori sinaptici può confermare la localizzazione presinaptica.
• Essendo un anticorpo policlonale, verificare la coerenza tra lotti nel proprio sistema di analisi specifico per garantire la riproducibilità.
• L'anticorpo è applicabile all'ELISA; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione in base al formato del proprio test.

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