Anticorpo policlonale di coniglio anti-GALNT3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14435

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GALNT3

• GALNT3 codifica la polipeptide N-acetilgalattosaminiltransferasi 3 (GalNAc-T3), una proteina di membrana di tipo II che avvia la O-glicosilazione di tipo mucinico trasferendo N-acetil-D-galattosamina (GalNAc) ai residui di serina o treonina delle proteine bersaglio.
• Catalizza il primo passaggio impegnato nella biosintesi degli oligosaccaridi O-legati, una modifica fondamentale per la stabilità delle proteine, la secrezione e le interazioni sulla superficie cellulare. Riferimenti correlati: PMID:16638743, PMID:31932717, PMID:8663203
• I substrati includono la glicoproteina gp120 dell'involucro di HIV, EA2, MUC2, MUC1A, MUC5AC, fibronectina e il fattore di crescita dei fibroblasti 23 (FGF23), dimostrando ruoli diversificati nella modifica dell'involucro virale, nella produzione di mucine, nella biologia della matrice e nel metabolismo dei fosfati. Riferimenti correlati: PMID:8663203, PMID:9295285, PMID:16638743, PMID:31932717
• La glicosilazione di FGF23 da parte di GALNT3 è essenziale per la secrezione di FGF23 intatto; le mutazioni con perdita di funzione causano la calcinosi tumorale familiare iperfosfatemica (HFTC) e la sindrome da iperostosi-iperfosfatemia. Riferimenti correlati: PMID:16638743, PMID:31932717
• Risiede nella membrana dell'apparato di Golgi, in accordo con il suo ruolo nella modificazione post-traduzionale all'interno della via secretoria.
• L'espressione tissutale è più elevata negli organi contenenti ghiandole epiteliali secretorie—pancreas, pelle, rene e testicolo—con livelli inferiori in prostata, ovaio, intestino, colon, placenta e polmone.
• Contiene un'elica transmembrana, una regione stalk e domini catalitico e lectinico tandem; richiede manganese per l'attività e va incontro a splicing alternativo e autoglicosilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 43–160) si trova nella regione N-terminale stalk/catalitica; la natura policlonale probabilmente consente il rilevamento in condizioni denaturanti e native, rendendolo compatibile con WB, IHC-P, IF/ICC ed ELISA.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 73 kDa; a causa della glicosilazione specifica dei tessuti, le bande possono presentare uno spostamento. Si consiglia di utilizzare lisati pancreatici o renali come controlli positivi e di includere enzimi di deglicosilazione per confermare la specificità.
• In IHC-P e IF/ICC, prevedere un segnale elevato in pancreas, pelle, rene e testicolo. Ottimizzare il recupero antigenico e il blocco per ciascun tipo di tessuto e validare con un controllo negativo appropriato.
• Per l'ELISA, utilizzare una coppia di anticorpi compatibili che riconoscano epitopi non sovrapposti per evitare la competizione. Confermare il rilevamento della proteina GALNT3 ricombinante come standard.
• Sebbene presenti reattività crociata con topo e ratto, verificare l'identità della sequenza nella regione dell'immunogeno se si prevedono confronti tra specie; eseguire controlli IgG abbinati alla specie per escludere il legame aspecifico.
• Essendo una preparazione policlonale, la coerenza tra diversi lotti può variare. Per i saggi quantitativi critici, convalidare nuovamente ogni nuovo lotto con il proprio sistema di campioni.

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