Anticorpo policlonale coniglio Anti-GARS (validato KO) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P41250

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Glicina-tRNA ligasi (GARS)

• Il gene GARS codifica per la Glicina-tRNA ligasi (GlyRS; designata anche come GARS1), un enzima bifunzionale che agisce sia come aminoacil-tRNA sintetasi sia come diadenosina tetrafosfato (Ap4A) sintetasi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17544401 PMID:24898252 PMID:28675565 PMID:19710017
• Nel suo ruolo principale, GARS catalizza la legazione dipendente dall'ATP della glicina al suo tRNA correlato, formando Gly-AMP, un passaggio critico per la biosintesi proteica. Produce anche Ap4A, una molecola di segnalazione universale, condensando due molecole di ATP, contribuendo quindi alla regolazione cellulare e all'omeostasi di Ap4A.
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• GARS appartiene alla famiglia delle aminoacil-tRNA sintetasi di classe II ed è altamente conservata negli eucarioti.
• La proteina si localizza in più compartimenti subcellulari, tra cui citoplasma, mitocondri ed esosomi extracellulari, ed è presente anche nelle proiezioni assoniche, riflettendo i suoi diversi ruoli cellulari.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività enzimatica e la distribuzione subcellulare.
• Espressa ampiamente in tutti i tessuti, GARS è presente in modo particolare nel cervello, midollo spinale, muscolo, cuore, milza e fegato, a conferma della sua importanza sia nei sistemi neuronali che non neuronali.
• Le mutazioni in GARS sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 2D (CMT2D) e all'atrofia muscolare spinale distale di tipo V (dSMA-V), collegando la disfunzione della glicil-tRNA sintetasi alla patogenesi della neuropatia periferica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 60–370 della GARS umana (NP_002038.2), una regione conservata; è prevedibile la reattività crociata con topo e ratto, ma si raccomanda la validazione nel sistema di specie desiderato.
• Per Western blot (WB), è prevista una banda a circa 83 kDa; si consiglia l'utilizzo di lisati cellulari totali di tessuti neuronali o linee cellulari di uomo, topo o ratto (per esempio SH-SY5Y, HeLa).
• Per immunoistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), le condizioni ottimali di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo possono richiedere una determinazione empirica; si consiglia di includere controlli appropriati.
• Le applicazioni ELISA possono essere esplorate, ma gli utenti dovranno ottimizzare le condizioni di rivestimento e le concentrazioni di anticorpo in base al loro specifico formato di saggio.

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