Anticorpo policlonale anti-GATA3 per WB ed ELISA - P23771

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: funzione e localizzazione di GATA3

• GATA3 (GATA-binding factor 3) è un fattore di trascrizione a dita di zinco appartenente alla famiglia GATA, caratterizzato da due motivi a dita di zinco di tipo C4 che mediano il legame al DNA con la sequenza consenso 5'-AGATAG-3'.
• Agisce come attivatore trascrizionale essenziale per l'espressione dei geni del recettore delle cellule T alfa e delta ed è indispensabile per la differenziazione delle cellule T-helper 2 (Th2) durante le risposte immunitarie e infiammatorie.
• GATA3 regola positivamente l'espressione di ASB2 (per similarità) e coordina l'attivazione trascrizionale dei macrofagi guidata da IL33, inclusa la riprogrammazione metabolica dipendente da UCP2 verso un fenotipo antinfiammatorio.
• In risposta a lesioni tissutali, GATA3 agisce a valle della segnalazione di IL33 per promuovere la differenziazione dei macrofagi attivati alternativamente, contribuendo alla risoluzione dell'infiammazione.
• La proteina si localizza nel nucleo, coerentemente con il suo ruolo di fattore di trascrizione, ed è espressa principalmente nelle cellule T e nelle cellule endoteliali.
• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme; l'isoforma canonica ha un peso molecolare di circa 48 kDa (calcolato da Uniprot: 47916 Da).
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e le mutazioni in GATA3 sono associate a sordità e altre malattie (sindrome HDR).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende i 260 amminoacidi N-terminali della GATA3 umana, una regione contenente domini di transattivazione e parte del primo dito di zinco. Questo design può favorire il rilevamento sia dell'isoforma a lunghezza intera che di alcune isoforme troncate.
• Per il Western blot, si raccomandano estratti nucleari o lisati cellulari totali da linee cellulari T o macrofagi stimolati con IL33; è prevista una banda vicino a 48 kDa.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con la GATA3 di topo, consentendone l'uso in modelli murini, ma si consiglia la validazione nel sistema di campioni specifico (es. tipo di tessuto, condizioni di stimolazione).
• Nelle applicazioni ELISA, prendere in considerazione l'utilizzo di proteina GATA3 ricombinante o frammenti peptidici come standard di cattura e ottimizzare il bloccaggio per ridurre il background delle proteine nucleari.
• Data la natura policlonale, la coerenza tra lotti dovrebbe essere monitorata e gli esperimenti critici potrebbero trarre vantaggio dall'inclusione di un lisato di controllo knockdown o knockout.

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