Anti-GATA3 Rabbit PolymAb® per WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ChIP, ELISA - P23772

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GATA3

• GATA3 (fattore di legame GATA 3) è un attivatore trascrizionale che si lega all'enhancer dei geni del recettore delle cellule T alfa e delta, riconoscendo la sequenza consenso 5'-AGATAG-3'; è richiesto per la differenziazione delle cellule T helper 2 (Th2) durante le risposte immunitarie e infiammatorie.
• Regola positivamente l'espressione di ASB2, collegandosi alle vie di degradazione delle proteine. Riferimenti correlati: PMID:31175139
• Coordina l'attivazione trascrizionale dei macrofagi e il riprogrammazione metabolica dipendente da UCP2 in risposta a IL33, guidando la differenziazione dei macrofagi attivati alternativamente che risolvono l'infiammazione a seguito di danno tissutale.
• Si localizza nel nucleo, coerente con la sua funzione di fattore di trascrizione legante il DNA.
• Mostra un'espressione specifica delle cellule T, critica per lo sviluppo e le funzioni effetrici delle cellule T.
• Contiene due domini a dito di zinco di tipo C4 che mediano il legame al DNA e la regolazione trascrizionale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, che modula la sua attività regolatoria.
• Classificato come attivatore legante il DNA coinvolto nell'immunità, immunità innata e regolazione della trascrizione; membro della famiglia GATA di proteine a dito di zinco.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 135-258 di GATA3 murino, includendo il dominio di legame al DNA a dito di zinco; questa regione è altamente conservata e l'anticorpo è probabile che riconosca la proteina nativa in molteplici applicazioni.
• Per il Western blotting, prevedere una banda vicino a 48 kDa; considerare l'uso di estratti nucleari come controllo positivo e validare con lisati di cellule T appropriati.
• Nell'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), verificare l'efficienza di legame tramite PCR quantitativa a loci bersag noti di GATA3 e ottimizzare le condizioni di cross-linking per il tipo di cellula.
• Per l'immunofluorescenza e l'immunoistochimica, anticipare una colorazione nucleare; includere sempre un controllo senza primario e confermare la specificità utilizzando modelli Gata3-knockout o campioni trattati con siRNA.
• Titolare l'anticorpo per ogni applicazione e validare nel sistema biologico rilevante (umano, mouse o ratto) per stabilire le diluizioni di lavoro ottimali.

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