Anticorpo policlonale coniglio anti-GCAT per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75600

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GCAT

• GCAT codifica l'enzima mitocondriale 2-ammino-3-chetobutirrato coenzima A ligasi, noto anche come amminoacetone sintasi o glicina acetiltransferasi.
• Questa transferasi dipendente da piridossal fosfato (PLP) catalizza la scissione del 2-ammino-3-ossobutanoato in glicina e acetil-CoA, un passaggio chiave nella degradazione della treonina e nella biosintesi della glicina.
• GCAT si localizza prevalentemente nel mitocondrio, ma è stata rilevata anche nel nucleo.
• La proteina è espressa in modo marcato in cuore, cervello, fegato e pancreas, con un'ulteriore espressione nel polmone.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione, e lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• Le parole chiave di UniProt sottolineano il ruolo nell'attività di aciltransferasi, nella catalisi dipendente da PLP e nell'importazione di proteine mitocondriali tramite un peptide di transito.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 170-419 di GCAT umano, coprendo gran parte della proteina; di conseguenza, l'anticorpo può riconoscere più isoforme.
• Per Western blotting è attesa una banda corrispondente al peso molecolare previsto di circa 45 kDa; se disponibile, verificare l'assenza nei controlli knockout.
• Nell'IHC-P si prevede una colorazione positiva nei tessuti con elevata espressione come cuore, fegato, cervello e pancreas; includere l'omissione dell'anticorpo primario come controllo negativo.
• Per l'utilizzo in IF/ICC, la localizzazione mitocondriale suggerisce che una permeabilizzazione mite può essere sufficiente, ma si raccomanda una doppia marcatura con marcatori mitocondriali per confermare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, l'immunogeno ricombinante o la proteina bersaglio purificata possono essere utilizzati come antigene di rivestimento; si consiglia l'ottimizzazione empirica della concentrazione di rivestimento e delle condizioni di blocco.

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