Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-GCDH per WB, IHC-P, ELISA - Q92947

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GCDH

• La proteina GCDH (glutaril-CoA deidrogenasi), nota anche come GCD o ACAD5, catalizza la decarbossilazione ossidativa del glutaril-CoA a crotonil-CoA e CO₂ nella matrice mitocondriale. Questa reazione è un passaggio chiave nella degradazione della L-lisina, L-idrossilisina e L-triptofano.
• Come membro della famiglia delle acil-CoA deidrogenasi, GCDH utilizza la flavoproteina di trasferimento degli elettroni (ETF) come suo accettore di elettroni, e la sua attività è essenziale per un corretto catabolismo degli aminoacidi.
• L'isoforma Corta di GCDH, generata da splicing alternativo, è cataliticamente inattiva, suggerendo una complessità regolatoria. Entrambe le isoforme lunga e corta sono espresse nei fibroblasti e nel fegato.
• GCDH si localizza nella matrice mitocondriale, in linea con il suo ruolo nelle vie di ossidazione degli acidi grassi e degli aminoacidi.
• La proteina è una flavoproteina che lega FAD come cofattore, e la sua carenza causa acidosi glutarica di tipo I, un grave disturbo metabolico caratterizzato da danno neurologico e accumulo di acidi organici.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione, che può modularne l'attività o la stabilità.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli aminoacidi 149-438 di GCDH umano (NP_000150.1). Questa regione copre parte del dominio catalitico, generando probabilmente anticorpi che riconoscono sia l'isoforma lunga che quella corta se l'epitopo è presente in entrambe.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda intorno ai 48 kDa in base al peso molecolare previsto; tuttavia, la mobilità osservata può variare a causa di modifiche post-traduzionali o differenze isoformiche. Validare il peso molecolare rispetto ai controlli noti nel proprio sistema campione.
• L'anticorpo è segnalato reagire con campioni umani, di topo e di ratto. Per altre specie, l'omologia di sequenza dovrebbe essere verificata prima dell'uso e la reattività crociata dovrebbe essere verificata sperimentalmente.
• Quando si esegue IHC-P, le condizioni di recupero dell'antigene (es. buffer citrato pH 6.0 o buffer EDTA pH 9.0) e le diluizioni dell'anticorpo dovrebbero essere ottimizzate per il tipo di tessuto e il metodo di fissazione in esame.
• Essendo un anticorpo policlonale, è necessario considerare la potenziale variabilità tra i lotti; ogni nuovo lotto potrebbe richiedere una ri-ottimizzazione delle condizioni del saggio.

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