Anticorpo policlonale anti-GCH1 per WB, IF/ICC, ELISA - P30793

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GCH1

• GCH1 codifica la GTP cicloidrolasi 1 (GTP-CH-I), l'enzima limitante nella biosintesi della tetraidrobiopterina (BH4), un cofattore essenziale per le idrossilasi degli amminoacidi aromatici e le sintasi dell'ossido nitrico.
• L'isoforma funzionale (GCH-1) catalizza la conversione del GTP in trifosfato di diidroneopterina, mentre i ruoli delle varianti di splicing enzimaticamente inattive rimangono scarsamente compresi.
• GCH1 regola positivamente la sintesi dell'ossido nitrico nelle cellule endoteliali e può essere coinvolto nella sintesi della dopamina, collegandolo sia alla biologia vascolare sia a quella dei neurotrasmettitori.
• La proteina può modificare la sensibilità e la persistenza del dolore, suggerendo un ruolo nelle vie nocicettive.
• La localizzazione subcellulare comprende sia il citoplasma sia il nucleo, indicando potenziali funzioni separate e compartimentalizzate.
• Nell'epidermide, GCH1 è espresso prevalentemente nei cheratinociti basali indifferenziati e in sottopopolazioni di melanociti, suggerendo una regolazione specifica dei tessuti.
• L'enzima è una proteina allosterica legante il GTP, richiede zinco per la propria attività ed è regolato dalla fosforilazione.
• Le varianti associate a patologie causano distonia responsiva alla DOPA (DYT5), parkinsonismo atipico e iperfenilalaninemia, sottolineandone l'importanza clinica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale (aa 55–250) di GCH1 umano, che può reagire con l'isoforma funzionale GCH-1; tuttavia, si raccomanda la validazione rispetto ad altre varianti di splicing.
• Per SDS-PAGE in condizioni riducenti, il peso molecolare previsto è di circa 28 kDa; tuttavia, la migrazione endogena può variare a causa di modificazioni post-traduzionali.
• Quando si esegue l'immunofluorescenza, considerare la doppia colorazione con marcatori citoplasmatici e nucleari, poiché è stato riportato che GCH1 è presente in entrambi i compartimenti.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo dell'anticorpo in un formato di cattura o di rilevazione con controlli appropriati e ottimizzare le condizioni di rivestimento.
• È stata documentata la reattività crociata con topo e ratto; verificare le prestazioni nella matrice specifica del proprio campione.

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