Anticorpo monoclonale Anti-GCLC per WB, IF/ICC, ELISA - P48506

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GCLC

• GCLC, noto anche come catena pesante di GCS, gamma-ECS o gamma-glutamilcisteina sintetasi, è la subunità catalitica della glutammato-cisteina ligasi (GCL).
• Catalizza la ligazione ATP-dipendente di L-glutammato e L-cisteina, il primo e limitante passo nella biosintesi del glutatione (GSH), una via antiossidante critica.
• Insieme alla subunità regolatoria GCLM, GCLC forma l'oloenzima GCL eterodimerico, essenziale per mantenere l'omeostasi redox cellulare.
• Le parole chiave indicano che GCLC è soggetto ad acetilazione e fosforilazione, suggerendo una regolazione tramite modificazioni post-traduzionali.
• Le mutazioni in GCLC sono associate ad anemia emolitica ereditaria dovuta a carenza di glutatione, sottolineandone la rilevanza clinica.
• GCLC contiene un dominio di legame per l'ATP, coerente con il suo ruolo di ligasi che utilizza ATP per la sintesi del glutatione.
• È un membro del proteoma di riferimento ed è stato identificato in numerosi studi di proteomica, confermandone l'espressione ubiquitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (amminoacidi 1-135) di GCLC umano, una regione che può essere conservata tra le specie, in linea con la reattività crociata osservata con il topo.
• Per il western blot (WB), considerare di ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario e validare con lisati di controllo positivi e negativi che esprimono GCLC.
• Nell'immunofluorescenza / immunocitochimica (IF/ICC), assicurarsi metodi di fissazione e permeabilizzazione adeguati al proprio tipo cellulare; si raccomanda l'inclusione di controlli isotipo.
• Per l'ELISA, testare contro GCLC ricombinante o proteina nativa in lisati cellulari/tissutali; una titolazione a scacchiera può aiutare a determinare le concentrazioni ottimali di anticorpo e antigene.
• Data la reattività crociata con il topo, questo anticorpo può essere adatto per studi traslazionali in modelli roditori; si consiglia la validazione nella specie rilevante.
• Includere sempre controlli appropriati (ad es., campioni knockout o knockdown con siRNA) per confermare la specificità nel proprio sistema sperimentale.

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