Anticorpo Monoclonale Anti-GFAP per WB, IF, IHC-P, ELISA - P14136

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della GFAP

• La GFAP (Proteina Acida Fibrillare Gliale) è una proteina del filamento intermedio di classe III e un marker ben consolidato per gli astrociti nel sistema nervoso centrale.
• Svolge un ruolo critico nel distinguere gli astrociti da altre cellule gliali durante lo sviluppo del SNC (UniProt).
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma, formando reti filamentose.
• La GFAP mostra un'espressione tessuto-specifica in cellule prive di fibronectina, coerente con la sua specificità per le cellule gliali.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la citrullinazione, la metilazione e la fosforilazione, che possono regolare la dinamica e la funzione dei filamenti.
• Il gene della GFAP subisce splicing alternativo, dando origine a multiple isoforme con potenziale diversità funzionale.
• Le mutazioni nella GFAP sono associate alla malattia di Alexander, una leucodistrofia, evidenziando la sua importanza per l'integrità degli astrociti.
• Le parole chiave da UniProt includono: struttura 3D, a elica, sequenziamento proteico diretto, identificazione proteomica, proteoma di riferimento.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 60-383 della GFAP umana, coprendo una vasta regione interna della proteina. Questo design può consentire il riconoscimento di multiple isoforme di GFAP e la reattività crociata tra specie, come validato per topo e ratto.
• Per il Western blotting (WB), la banda osservata è prevista intorno a 50 kDa (peso molecolare teorico ~49,9 kDa). Si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali da tessuto cerebrale o astrociti coltivati.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P) e l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per preservare la struttura del filamento intermedio. La colorazione della GFAP dovrebbe produrre un tipico pattern citoplasmatico filamentoso negli astrociti.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; l'abbinamento con un anticorpo abbinato appropriato può migliorare la sensibilità.
• Data la natura monoclonale, ci si aspetta una coerenza da lotto a lotto, ma è consigliabile la validazione nell'impostazione sperimentale specifica.

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