Anticorpo Policlonale Anti-GIF Coniglio per WB, ELISA - P27352

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GIF

• La proteina codificata dal gene CBLIF (GIF) è il fattore intrinseco gastrico (IF), noto anche come fattore intrinseco legante la cobalamina, essenziale per l'assorbimento della vitamina B12 (cobalamina).
• GIF è una glicoproteina secreta dalle cellule della mucosa gastrica, prevalentemente cellule parietali, ed è prodotta come un precursore con un peptide segnale.
• Funzionalmente, GIF lega la cobalamina libera nello stomaco; dopo la scissione proteolitica nel duodeno, il complesso stabile GIF-cobalamina interagisce con il recettore cubilina (CUBN) nell'ileo, facilitando l'endocitosi mediata da recettore per l'assorbimento della vitamina B12.
• Il gene GIF subisce uno splicing alternativo, producendo più isoforme; varianti associate a malattie in CBLIF causano carenza di fattore intrinseco (IFD), portando ad anemia perniciosa a causa del ridotto assorbimento di B12.
• GIF è una fosfoproteina con multipli ponti disolfuro cruciali per la sua struttura e funzione, e appartiene a un gruppo di proteine coinvolte nel trasporto di cobalto e ioni.
• L'espressione tissutale è altamente specifica per la mucosa gastrica, coerente con il suo ruolo nell'assorbimento gastrointestinale della vitamina.
• Parole chiave associate a questa proteina includono variante di malattia, glicoproteina, secreta, segnale e trasporto, evidenziandone il significato clinico e funzionale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina ricombinante che comprende gli amminoacidi 19-417 di GIF umano, corrispondente alla proteina matura senza il peptide segnale, il che suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere la forma secreta endogena.
• Per il Western blot, considerare di confrontare condizioni SDS-PAGE riducenti e non riducenti, poiché GIF contiene multipli ponti disolfuro che possono influenzare la mobilità elettroforetica.
• Data l'espressione tessuto-specifica nella mucosa gastrica, validare l'anticorpo in lisati di stomaco di umano, topo o ratto, e considerare l'uso di un tessuto negativo come il fegato per il controllo di specificità.
• In ELISA, questo anticorpo policlonale può essere esplorato come reagente di cattura o di rilevamento; per un ELISA sandwich, si consiglia di accoppiarlo con un anticorpo monoclonale anti-GIF per migliorare la specificità.
• Poiché GIF è una proteina secreta, quando si analizzano i surnatanti di colture cellulari o tissutali, potrebbero essere necessari passaggi di concentrazione per rilevare i livelli endogeni tramite WB o ELISA.
• Poiché è riportata cross-reattività per topo e ratto, verificare la conservazione dell'epitopo e le prestazioni del saggio in queste specie utilizzando appropriati controlli positivi.

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