Anticorpo policlonale di coniglio Anti-GIF/Fattore Intrinseco per WB, IF/ICC, ELISA - P27352

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del GIF (Fattore Intrinseco)

• Il gene GIF codifica il fattore intrinseco legante la cobalamina, noto anche come fattore intrinseco gastrico (IF) o INF. Si tratta di una glicoproteina secreta con un peso molecolare di circa 45 kDa (UniProt: 45,416 Da).
• La sua funzione primaria è promuovere l'assorbimento della vitamina B12 (cobalamina) nell'ileo, formando un complesso con la cobalamina e interagendo con il recettore cubilina (CUBN) per l'endocitosi mediata da recettore.
• L'espressione è altamente specifica per la mucosa gastrica, dove viene secreta dalle cellule parietali.
• La proteina presenta caratteristiche come peptide segnale, legami disolfuro e siti di glicosilazione; è soggetta a splicing alternativo e fosforilazione (parole chiave UniProt).
• Appartiene alla famiglia dei trasportatori della cobalamina ed è coinvolto nel trasporto degli ioni cobalto. Le mutazioni di GIF sono associate alla deficienza congenita del fattore intrinseco, una forma rara di anemia megaloblastica.
• Sono disponibili studi strutturali tridimensionali (parola chiave UniProt: struttura 3D).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 20–300 del GIF umano, e copre la regione N-terminale includendo il sito di taglio del peptide segnale e il dominio di legame della cobalamina. Questa regione è relativamente conservata, e supporta la reattività crociata con il topo (come indicato).
• Per Western blot (WB), è attesa una banda intorno ai 45 kDa in lisati di tessuto gastrico o linee cellulari che esprimono GIF. Validare l'anticorpo nel sistema di campionamento appropriato, poiché la secrezione può comportare bassi livelli intracellulari.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), si consiglia la permeabilizzazione per rilevare i pool di proteine intracellulari durante la sintesi. Per la rilevazione della proteina secreta, l'aggiunta di un inibitore della secrezione (es. brefeldina A) può migliorare il segnale.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; tuttavia, l'abbinamento con un anticorpo monoclonale può migliorare la specificità nei formati ELISA sandwich.
• Includere sempre controlli positivi (estratto di mucosa gastrica) e negativi (tessuto non espressore) appropriati, e validare le prestazioni dell'anticorpo nel vostro contesto sperimentale.

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