Anticorpo Monoclonale Anti-Glucosio-6-Fosfato Isomerasi (GPI) [Convalidato KD] per WB, IF/ICC, ELISA - P06744

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Glucosio-6-Fosfato Isomerasi

• La glucosio-6-fosfato isomerasi (GPI) è anche nota come fattore di motilità autocrino (AMF), neurolechina (NLK), fosfoglucosio isomerasi (PGI), fosfoesoso isomerasi (PHI) e antigene spermatico 36 (SA-36).
• L'enzima catalizza la conversione dell'alfa-D-glucosio-6-fosfato in beta-D-fruttosio-6-fosfato, il secondo passo della glicolisi, e la reazione inversa nella gluconeogenesi, all'interno del citoplasma. Riferimenti correlati: PMID:28803808
• La GPI mostra anche attività C2-epimerasica, interconvertendo D-glucosio-6-fosfato e D-mannosio-6-fosfato, e attività anomerasica per multipli esosi-6-fosfati.
• Oltre al suo ruolo metabolico, la GPI extracellulare funziona come una citochina: come fattore di motilità autocrino (AMF), un fattore angiogenico secreto che aumenta la motilità delle cellule endoteliali. Riferimenti correlati: PMID:11437381
• Agisce anche come neurolechina, un fattore neurotrofico che supporta la sopravvivenza dei neuroni spinali e sensoriali, ed è rilasciata dai linfociti T stimolati da lectine per indurre la secrezione di immunoglobuline. Riferimenti correlati: PMID:11004567 PMID:3352745
• A livello subcellulare, la GPI si trova nel citoplasma ed è secreta.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, idrossilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina; lo splicing alternativo produce multiple isoforme.
• Le mutazioni nella GPI sono associate ad anemia emolitica ereditaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato utilizzando un immunogeno ricombinante che comprende gli amminoacidi 1-280 della GPI umana (NP_000166.2), che può riconoscere epitopi conservati; la reattività crociata con topo e ratto è confermata.
• Per il Western blotting (WB), ci si aspetta una banda intorno ai 63 kDa; considerare l'uso di condizioni riducenti e appropriati controlli positivi come lisati cellulari umani, di topo o di ratto.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), notare che la GPI è citoplasmatica e secreta; per la rilevazione intracellulare potrebbe essere necessaria fissazione e permeabilizzazione, e considerare la co-colorazione con marcatori di organelli.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; convalidare con proteina GPI ricombinante o campioni biologici per stabilire linearità e sensibilità.
• Essendo un anticorpo monoclonale, ci si aspetta consistenza tra i lotti, ma è sempre necessario ottimizzare le diluizioni di lavoro per il saggio specifico e il tipo di campione.
• L'anticorpo è etichettato come convalidato KD; considerare di incorporare appropriati controlli di knockdown nei propri esperimenti per confermare la specificità.

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