Anticorpo policlonale anti-Glucosilceramidasi beta (GBA) per WB, ELISA - P04062

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Glucosilceramidasi beta (GBA)

• La Glucosilceramidasi beta (GBA), nota anche come glucosilceramidasi acida lisosomiale o beta-glucocerebrosidasi, è un enzima lisosomiale che idrolizza i glucosilceramidi in glucosio e ceramide (PubMed:15916907, PubMed:24211208, PubMed:32144204). Riferimenti correlati: PMID:15916907, PMID:24211208, PMID:32144204
• La GBA svolge un ruolo centrale nella degradazione dei lipidi complessi e nel ricambio delle membrane cellulari e, attraverso la produzione di ceramide, partecipa alla via di recupero attivata dalla PKC per la formazione di ceramide (PubMed:27378698, PubMed:19279011). Riferimenti correlati: PMID:27378698, PMID:19279011
• Espone anche attività transglucosilazione, catalizzando il trasferimento del glucosio dal glucosilceramide al colesterolo per formare il colesterile glucoside (PubMed:24211208, PubMed:26724485, PubMed:32144204). Riferimenti correlati: PMID:24211208, PMID:26724485, PMID:32144204
• Inoltre, la GBA può idrolizzare i galattosilceramidi e il colesterile glucoside, sebbene con attività inferiore, e può metabolizzare glicosil fitosteroli vegetali (PubMed:32144204, PubMed:39395789). Riferimenti correlati: PMID:32144204, PMID:39395789
• È localizzata alla membrana del lisosoma, coerente con il suo ruolo nel catabolismo lipidico lisosomiale.
• Le mutazioni della GBA causano la malattia di Gaucher, il disturbo di accumulo lisosomiale più comune, e sono associate a un aumentato rischio di malattia di Parkinson.
• La proteina subisce un inizio alternativo e uno splicing e contiene ponti disolfuro essenziali per la sua struttura; è anche glicosilata.
• La proteina matura ha un peso molecolare approssimativo di 60 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 40–250 della GBA umana, una regione che include parte del dominio catalitico. Considerare l'allineamento delle sequenze con la specie bersaglio quando si interpreta la reattività crociata.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a ~60 kDa; validare la specificità dell'anticorpo con appropriati controlli positivi (es. frazioni lisosomiali umane o di ratto) e controlli negativi.
• Nell'ELISA, l'utilizzo dell'immunogeno ricombinante come antigene di rivestimento può essere utile; il rilevamento della GBA nativa nei lisati deve essere ottimizzato empiricamente.
• Poiché la GBA ha multiple isoforme derivanti da splicing alternativo, confermare che l'anticorpo riconosca l'isoforma rilevante nel proprio sistema sperimentale, se necessario.

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