Anticorpo policlonale coniglio anti-GM130 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q08379

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del GM130

• GM130 (membro A della sottfamiglia Golgin) è una proteina di membrana periferica dello stack cis-Golgi, che agisce come scheletro di membrana che mantiene la struttura del Golgi e facilita l'aggancio delle vescicole (Probabile) (PubMed:16489344). Riferimenti correlati: PMID:16489344
• Insieme a p115/USO1 e STX5, media l'aggancio e la fusione delle vescicole alla membrana cis-Golgi per mantenere la struttura impilata e interconnessa dell'apparato di Golgi.
• GM130 è essenziale per la smissione mitotica del Golgi: la fosforilazione a Ser-37 da parte di CDK1 all'inizio della mitosi inibisce l'interazione con p115, impedendo l'aggancio delle vescicole COPI e bloccando il trasporto.
• Gioca un ruolo chiave nell'assemblaggio del polo del fuso e nell'organizzazione del centrosoma (PubMed:26165940). GM130 promuove l'assemblaggio del polo del fuso reclutando TPX2 sulle membrane del Golgi, che attiva la chinasi AURKA e stimola la nucleazione locale dei microtubuli, collegando così le membrane del Golgi al fuso mitotico (PubMed:19242490, PubMed:26165940). Riferimenti correlati: PMID:26165940 PMID:19242490
• Regola anche l'organizzazione del centrosoma indipendentemente dal suo ruolo nella struttura del Golgi (PubMed:18045989, PubMed:19109421). Riferimenti correlati: PMID:18045989 PMID:19109421
• GM130 è richiesto per la formazione del nastro del Golgi e per la glicosilazione corretta delle proteine di membrana e secretorie (PubMed:16489344, PubMed:17314401). Riferimenti correlati: PMID:16489344 PMID:17314401
• A livello subcellulare, GM130 localizza alla membrana della rete cis-Golgi, alla membrana del compartimento intermedio ER-Golgi e alla regione del polo del fuso del citoscheletro.
• GM130 presenta domini a elica ricoperta (coiled-coil) e subisce fosforilazione e metilazione; le mutazioni in GOLGA2 sono associate a disabilità intellettiva.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 20–300 del GM130 umano) comprende la regione N-terminale a elica ricoperta coinvolta nel legame con p115; considerare questo fattore quando si interpretano i pattern di bande o il potenziale riconoscimento di isoforme nel Western blot.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~113 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 6–8% SDS-PAGE) e protocolli di trasferimento efficienti per proteine ad alto peso molecolare.
• Nelle applicazioni IHC-P e IF/ICC, ottimizzare i passaggi di recupero dell'antigene e di permeabilizzazione per garantire l'accessibilità al bersaglio localizzato al cis-Golgi; convalidare nel proprio specifico tessuto o sistema cellulare.
• Quando si utilizza l'ELISA, valutare la idoneità dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento; la reattività crociata con GM130 murino e ratto può essere vantaggiosa per studi multispecie.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata per saggi quantitativi critici e si raccomandano controlli appropriati per confermare la specificità.

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