Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-GNAT1 per WB, ELISA - P11488

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GNAT1

• GNAT1 codifica per la catena alfa-1 della transducina, la subunità alfa della proteina G eterotrimerica specifica per i bastoncelli che accoppia la rodopsina alla cGMP-fosfodiesterasi (PDE6) nella cascata della fototrasduzione. Riferimenti correlati: PMID:22190596
• Funziona come un interruttore molecolare GTPasico: lo stato inattivo legato al GDP viene attivato dalla rodopsina stimolata dalla luce, portando al legame del GTP e alla successiva attivazione della PDE6, che idrolizza il cGMP e chiude i canali cationici nei segmenti esterni dei bastoncelli.
• Necessaria per una normale visione scotopica (luce fioca); mutazioni di perdita di funzione causano cecità notturna congenita stazionaria (CSNB) tipo 1G e CSNBAD3. Riferimenti correlati: PMID:22190596
• Espressa prevalentemente nelle cellule fotorecettrici a bastoncello della retina, con espressione minore rilevata nel corpo ciliare, nell'iride e nell'epitelio pigmentato retinico. Riferimenti correlati: PMID:1614872, PMID:22190596
• Si localizza a livello subcellulare nelle membrane del segmento esterno e del segmento interno dei fotorecettori, in linea con il suo ruolo nella macchina di trasduzione visiva.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la N-miristoilazione, che facilita l'associazione alla membrana, e la fosforilazione, che modula l'attività di segnalazione.
• Contiene domini conservati di legame del nucleotide guaninico e GTPasici essenziali per lo scambio e l'idrolisi del nucleotide, comuni alla famiglia delle subunità alfa delle proteine G.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 58–178 di GNAT1 umano, una regione probabilmente esposta al solvente nella proteina nativa e conservata tra le specie, supportando la reattività crociata segnalata con topo e ratto.
• Per il Western blot, GNAT1 ha un peso molecolare previsto di ~40 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e caricare lisati di tessuto retinico come controlli positivi.
• Per l'ELISA, considerare sia il formato diretto che quello sandwich; essendo un anticorpo policlonale, può offrire una rilevazione robusta ma la coerenza tra i lotti dovrebbe essere verificata.
• Data l'elevata omologia di sequenza tra le subunità alfa delle proteine G, è possibile una reattività crociata con proteine correlate (es. GNAI1, GNAI2); includere controlli appropriati quando si testano campioni non retinici.
• Spedire in sacche di ghiaccio per garantirne la stabilità; al ricevimento, aliquottare e conservare a -20°C o -80°C ed evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento.

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