Anticorpo policlonale di coniglio anti-GNAT3 per WB, IF/ICC, ELISA - A8MTJ3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GNAT3

• La subunità alfa-3 della proteina G legante i nucleotidi della guanina G(t), nota anche come catena alfa-3 della gustducina, è codificata dal gene GNAT3 e appartiene alla famiglia delle subunità alfa delle proteine G eterotrimeriche.
• Svolge un ruolo importante nella trasduzione dei gusti amaro, dolce e umami, collegando specifici recettori del gusto sulla superficie cellulare con una cGMP-fosfodiesterasi, determinando una diminuzione dei livelli intracellulari di cAMP e cGMP e il conseguente ingresso di calcio. Riferimenti correlati: PMID:38600377 PMID:38776963
• L'eterotrimero della gustducina media le risposte ai composti amari e dolci: la subunità alfa regola l'attività della fosfodiesterasi, mentre le subunità beta/gamma attivano la fosfolipasi C, determinando un aumento dell'inositolo trisfosfato e del calcio intracellulare.
• GNAT3 si associa funzionalmente agli eterodimeri dei recettori del gusto: TAS1R2/TAS1R3 per la percezione del dolce e TAS1R1/TAS1R3 per il gusto umami, nonché ai recettori amari della famiglia T2R, come TAS2R14. Riferimenti correlati: PMID:38600377 PMID:38776963
• Nel tratto gastrointestinale, GNAT3 agisce come sensore degli zuccheri nel lume delle cellule enteroendocrine, controllando l'espressione del cotrasportatore sodio-glucosio SGLT1 e stimolando la secrezione degli ormoni incretinici GLP-1 e GIP, collegando così la segnalazione del gusto alla regolazione metabolica e all'omeostasi del glucosio.
• La localizzazione subcellulare è citoplasmatica, con espressione tessuto-specifica nelle papille gustative circumvallate e foliate, nelle cellule L enteroendocrine dell'intestino e negli spermatozoi.
• Il peso molecolare annotato è di circa 40 kDa; le modifiche post-traduzionali includono la miristoilazione, che può facilitare l'associazione alla membrana.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 60–130 di GNAT3 (NP_001095856.1), una regione interna; si prevede che l'anticorpo policlonale risultante riconosca sia la proteina nativa sia quella denaturata, rendendolo adatto ad applicazioni quali WB, IF/ICC ed ELISA.
• Per il Western blot, la banda prevista è di circa 40 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni di bloccaggio e una diluizione dell'anticorpo primario adeguate ai livelli di espressione endogena nei tessuti gustativi o intestinali.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione, poiché GNAT3 è una proteina citoplasmatica; includere controlli negativi appropriati e una controcolorazione.
• Quando si esegue un ELISA, tenere presente che gli anticorpi policlonali possono fornire un segnale più elevato grazie al legame a più epitopi; titolare l'anticorpo e utilizzare un sistema di rilevamento secondario compatibile.
• Confermare la reattività crociata con campioni murini e umani; validare le prestazioni nel tessuto o nella linea cellulare di interesse specifico.

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