Anticorpo policlonale di coniglio anti-GOLGA5 per WB, IF/ICC, ELISA - Q8TBA6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GOLGA5

• GOLGA5, noto anche come Golgin-84, proteina 5 del gene fuso a RET o proteina 31 inducente la proliferazione cellulare, è un membro della famiglia delle golgine, caratterizzato da domini coiled-coil e da un'elica transmembrana C-terminale.
• È localizzato nella membrana dell'apparato del Golgi e svolge un ruolo fondamentale nel mantenimento dell'architettura del Golgi, promuovendo la formazione di cisterne impilate e di strutture nastriformi.
• Dal punto di vista funzionale, GOLGA5 partecipa al trasporto retrogrado intra-Golgi, facilitando il riciclo degli enzimi residenti del Golgi e mantenendo l'omeostasi dell'organello.
• La proteina è soggetta a varie modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione e fosforilazione, come identificato dagli studi di proteomica.
• L'espressione nei tessuti è ubiquitaria, ma risulta notevolmente arricchita nel testicolo (tubuli seminiferi e cellule di Leydig), mentre è quasi assente negli spermatozoi, indicando un pattern di espressione regolato durante la spermatogenesi.
• GOLGA5 è associato a riarrangiamenti cromosomici (ad esempio, fusioni RET) e subisce splicing alternativo, producendo molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende i primi 300 amminoacidi N-terminali di GOLGA5 umano, inclusi regioni coiled-coil predette; questo design può favorire il rilevamento della proteina a lunghezza intera in condizioni denaturanti e native.
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda intorno a 83 kDa; assicurarsi di effettuare un adeguato blocco della membrana e considerare un controllo positivo, come i lisati di HeLa o HEK293, nei quali GOLGA5 è espresso endogenamente.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), prevedere una colorazione perinucleare simile a quella del Golgi; la co-colorazione con un marcatore del Golgi (ad esempio GM130) può confermare la specificità della localizzazione.
• È riportato che l'anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto; pertanto, i ricercatori possono validarene le prestazioni in queste specie, ma si raccomanda un'ottimizzazione specifica per specie (ad esempio, diluizione dell'anticorpo e condizioni di blocco).
• Sebbene sia indicata la reattività in ELISA, è consigliabile valutare le prestazioni dell'anticorpo nello specifico formato del test e nelle condizioni di rivestimento di interesse.

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