Anticorpo Policlonale Anti-GPD2 per WB, ELISA - P43304

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GPD2

• GPD2 codifica per la glicerolo-3-fosfato deidrogenasi mitocondriale (mGDH), una flavoproteina ossidoreduttasi che catalizza l'ossidazione del glicerolo-3-fosfato in diidrossiacetone fosfato, immettendo elettroni nella catena di trasporto degli elettroni. È un enzima calcio-responsivo cruciale per il rilevamento del glucosio e la secrezione di insulina nelle cellule beta pancreatiche.
• La proteina funge da componente chiave della navetta del glicerolo fosfato, che trasferisce equivalenti riducenti dal NADH citosolico alla catena respiratoria mitocondriale, collegando la glicolisi alla fosforilazione ossidativa.
• mGDH si localizza sulla membrana mitocondriale interna e contiene un peptide segnale per il targeting mitocondriale, insieme a un dominio di legame per il dinucleotide adenina flavina (FAD) essenziale per l'attività enzimatica.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, e la proteina lega calcio e altri ioni metallici, che ne modulano la funzione catalitica.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme; l'isoforma canonica ha un peso molecolare calcolato di circa 81 kDa (80853 Da, UniProt P43304).
• Come membro della famiglia della glicerolo-3-fosfato deidrogenasi, GPD2 è centrale nel metabolismo lipidico e nell'omeostasi energetica, con implicazioni nel diabete e nei disturbi metabolici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 25–325 di GPD2 umano, coprendo una regione a valle del peptide di transito mitocondriale. Questo design può riconoscere preferenzialmente la forma matura e processata della proteina.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto di GPD2 è di ~81 kDa. Si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali da tessuti pancreatici, epatici o muscolari, o da linee cellulari pertinenti come INS-1 o HepG2, dove è attesa l'espressione di mGDH.
• È specificata la reattività crociata con topo e ratto; si raccomanda la validazione in queste specie confrontando campioni tissutali o controlli di proteina ricombinante per confermare un rilevamento comparabile.
• Nelle applicazioni ELISA, titolare sia l'antigene di rivestimento (proteina ricombinante o lisato tissutale) che la concentrazione dell'anticorpo primario per ottimizzare il rapporto segnale-rumore. Includere controlli per effetti di matrice.
• Poiché l'attività di GPD2 è dipendente dal calcio, evitare chelanti del calcio nei buffer di lisi o di saggio a meno che il loro effetto non sia caratterizzato sperimentalmente.

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