Anticorpo policlonale anti-GPR6 per WB, ELISA - P46095

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GPR6

• GPR6 (recettore accoppiato alle proteine G 6, noto anche come recettore GPR6 della sfingosina-1-fosfato) è un membro della superfamiglia dei GPCR ed è codificato dal gene GPR6 (GeneID: 2830).
• Funziona come un recettore costitutivamente attivo che mantiene elevati livelli intracellulari di cAMP accoppiandosi alle proteine G(s), svolgendo così un ruolo nello sviluppo neuronale. Riferimenti correlati: PMID:12220620, PMID:39626010
• GPR6 può essere attivato da agonisti derivati dai lipidi, tra cui l'acido oleico e la sfingosina-1-fosfato, che stimolano ulteriormente la cascata di segnalazione G(s)/cAMP/PKA. Riferimenti correlati: PMID:12220620, PMID:39626010
• Il recettore è localizzato nella membrana cellulare, in accordo con la sua struttura a sette domini transmembrana.
• È soggetto a modificazioni post-traduzionali: glicosilazione, palmitoilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività e il traffico cellulare (parole chiave UniProt: Glicoproteina, Lipoproteina, Palmitato, Fosfoproteina).
• Lo splicing alternativo genera molteplici varianti trascrizionali (parola chiave: Splicing alternativo).
• GPR6 è coinvolto in studi di identificazione proteomica, indicando la sua espressione a livello proteico in tessuti/cellule umani (parola chiave: Identificazione proteomica).
• È stata risolta una struttura 3D di GPR6, facilitando la comprensione dei suoi meccanismi di legame al ligando e di segnalazione (parola chiave: Struttura 3D).

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla coda citoplasmatica C-terminale (aa 253–362) di GPR6 umano, una regione probabilmente accessibile nelle condizioni denaturanti del Western blot, ma potenzialmente non accessibile nell'ELISA nativo; si consiglia di ottimizzare il recupero dell'antigene o di utilizzare campioni denaturati.
• Per il Western blot, utilizzare lisati cellulari totali provenienti da linee cellulari che esprimono GPR6 endogenamente o esogenamente; dovrebbe essere rilevata una banda a circa 38 kDa. I livelli di espressione endogena possono variare, pertanto è necessario validare il prodotto nel proprio sistema campione specifico.
• È indicata la reattività crociata con campioni umani e murini; confermare la specificità utilizzando controlli positivi e negativi appropriati per la specie bersaglio.
• Per l'ELISA, testare sia formati di antigene denaturato sia nativo per determinare le condizioni di rilevazione ottimali, poiché l'epitopo potrebbe essere sensibile alla denaturazione.
• Essendo un anticorpo policlonale, questa preparazione può riconoscere più epitopi; per applicazioni altamente specifiche, considerare la purificazione per affinità.

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