Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-GPX3 per WB ed ELISA - P22352

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GPX3

• La glutatione perossidasi 3 (GPX3) è un enzima selenoproteico appartenente alla famiglia delle glutatione perossidasi, nota anche come glutatione perossidasi extracellulare o plasmatica (GPx-P/GSHPx-P).
• Catalizza la riduzione del perossido di idrogeno, dei perossidi lipidici e degli idroperossidi organici utilizzando il glutatione come agente riducente, proteggendo così le cellule e gli enzimi dai danni ossidativi.
• La presenza di un residuo di selenocisteina (Sec) nel suo sito attivo è fondamentale per la sua attività perossidasica; GPX3 è quindi classificata come una selenoproteina.
• GPX3 è una proteina secreta, principalmente presente nel plasma, dove contribuisce alla difesa antiossidante sistemica detossificando i perossidi nell'ambiente extracellulare.
• Viene sintetizzata come un precursore con un peptide segnale, che ne dirige la secrezione; la proteina matura ha un peso molecolare di circa 26 kDa (calcolato 25,5 kDa).
• Sono stati condotti studi strutturali tridimensionali e sequenziamento proteico diretto, confermandone l'identità e i siti funzionali.
• Parole chiave: Ossidoriduttasi, perossidasi, proteoma di riferimento, e identificazione proteomica ad alta affidabilità.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato sugli amminoacidi 1-100 di GPX3 umano (NP_002075.2); questa regione N-terminale include il peptide segnale e parte della proteina matura, potenzialmente generando anticorpi che riconoscono sia le forme precursore che mature.
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di condizioni denaturanti e riducenti, e validare il rilevamento di GPX3 endogeno in estratti di plasma/tessuto di topo o ratto, data la reattività incrociata riportata.
• Il peso molecolare previsto è di 26 kDa; la percentuale di gel appropriata (es. SDS-PAGE al 12%) e le condizioni di transfer dovrebbero essere ottimizzate; potrebbe essere osservata una banda vicino ai 26 kDa.
• Per le applicazioni ELISA, può essere utilizzato un rivestimento con GPX3 ricombinante o GPX3 plasmatica catturata; gli anticorpi policlonali potrebbero richiedere un'attenta titolazione per garantire la specificità.
• Essendo un anticorpo policlonale, la variabilità da lotto a lotto dovrebbe essere monitorata, e controlli appropriati (es. campioni knockout, pre-adsorbimento con peptide) possono aiutare a confermare la specificità.

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