Anticorpo policlonale coniglio anti-Granulin per WB ed ELISA - P28799

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Granulina

• La Progranulina (GRN, nota anche come GEP, GP88, PEPI, PGRN, CLN11, PCDGF) è una glicoproteina secreta critica per l'omeostasi lisosomiale, regolando il traffico proteico verso i lisosomi, l'attività degli enzimi lisosomiali e l'acidificazione, che facilita la degradazione mediata da CTSB della CTSD matura. Riferimenti correlati: PMID:28453791, PMID:28541286, PMID:28073925
• Agisce come fattore di crescita nella guarigione delle ferite e nell'infiammazione, promuovendo direttamente la divisione dei fibroblasti dermici e delle cellule endoteliali, la migrazione e la formazione di tubuli simili a capillari, e protegge anche le cellule epiteliali bloccando l'attivazione dei neutrofili mediata dal TNF. Riferimenti correlati: PMID:12526812
• La progranulina modula l'infiammazione neuronale, supportando la sopravvivenza dei neuroni, l'espansione assonale e l'integrità, con implicazioni nella neurodegenerazione. Riferimenti correlati: PMID:18378771
• Il processamento proteolitico della proteina a lunghezza intera genera vari peptidi granulina, alcuni dei quali inibiscono indipendentemente la proliferazione delle cellule epiteliali e inducono la secrezione di IL-8.
• La progranulina stabilizza anche la catepsina D (CTSD) attraverso interazione diretta, mantenendo la sua attività peptidasi di tipo aspartico.
• La proteina è localizzata sia extracellularmente (secretata) che all'interno dei lisosomi, in coerenza con i suoi ruoli nella segnalazione dei fattori di crescita e nella funzione lisosomiale.
• È ampiamente espressa, con i livelli più alti nel rene, e si trova nelle cellule epiteliali, nei fibroblasti, nelle linee cellulari leucemiche mielogeni, nelle cellule infiammatorie e nel midollo osseo.
• La sequenza proteica della progranulina contiene molteplici ripetizioni granulina stabilizzate da legami disolfuro e subisce glicosilazione. Parole chiave: Splicing alternativo, Legame disolfuro, Glicoproteina, Segnale, Ripetizione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 18-593) copre la proteina progranulina matura, quindi questo anticorpo policlonale potrebbe rilevare la progranulina a lunghezza intera (~64 kDa) e potenzialmente alcuni peptidi granulina processati in WB.
• Per il Western blotting, utilizzare una SDS-PAGE riducente e validare la dimensione della banda prevista; la glicosilazione può causare lievi spostamenti. Includere appropriati controlli positivi come linee cellulari epiteliali o lisati di tessuto renale.
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo monoclonale di cattura per migliorare la specificità e validare il rilevamento nel siero o nei sovranatanti di coltura cellulare dove la progranulina è secreta.
• La reattività crociata con topo e ratto è riportata; tuttavia, gli utenti devono validare l'anticorpo nel loro specifico sistema sperimentale per confermare la reattività e la diluizione ottimale.
• Dato che la progranulina è coinvolta nella funzione lisosomiale, considerare l'uso di inibitori lisosomiali negli saggi basati su cellule per studiarne il processamento e il traffico.

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