Anticorpo policlonale anti-Granzima B per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P10144

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Granzima B

• La Granzima B, nota anche come C11, CTLA-1, Catepsina G-simile 1 (CTSGL1), Fragmentin-2 e HLP, è una serina proteasi codificata dal gene GZMB nell'uomo. È un componente chiave dei granuli delle cellule T citotossiche e delle cellule NK.
• Questa proteasi taglia specificamente dopo i residui di acido aspartico, una preferenza di substrato condivisa con le caspasi, consentendole di attivare molteplici vie di morte a valle. Riferimenti correlati: PMID:1985927, PMID:8258716
• In seguito al rilascio mediato dalla sinapsi immunologica nelle cellule bersaglio, la Granzima B taglia direttamente la gasdermina-E (GSDME), liberando il suo dominio di formazione dei pori per innescare la piroptosi, una forma altamente infiammatoria di morte cellulare programmata. Riferimenti correlati: PMID:31953257, PMID:32188940
• La Granzima B attiva proteoliticamente anche le caspasi-3, -9 e -10, collegando la citotossicità mediata dall'esocitosi dei granuli all'esecuzione apoptotica classica. Riferimenti correlati: PMID:9852092
• Nel contesto dell'infezione batterica, la Granzima B può tagliare e attivare la caspasi-7 (CASP7) per facilitare la riparazione della membrana plasmatica, una funzione dedotta dalla similarità di sequenza.
• A livello subcellulare, la Granzima B viene immagazzinata e secreta dai granuli citolitici; contiene un peptide segnale N-terminale e subisce l'attivazione dello zimogeno prima di acquisire la piena attività proteolitica.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e la formazione di ponti disolfuro, entrambe critiche per il corretto ripiegamento, il traffico e la stabilità.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente ai residui 100–200 della Granzima B umana. Ciò probabilmente porta a un anticorpo che riconosce un epitopo lineare, rendendolo adatto per applicazioni denaturanti come il WB.
• Per il WB, considerare la validazione della rilevazione di una banda principale a circa 28kDa in condizioni riducenti, corrispondente allo zimogeno o alla Granzima B matura. Gli intermedi di elaborazione possono apparire a pesi molecolari inferiori.
• Data la sua reattività crociata con la Granzima B murina, l'anticorpo può essere utilizzato in modelli di tessuto o cellulari murini, ma gli utenti dovrebbero convalidare le prestazioni specifiche della specie nel proprio sistema sperimentale.
• In IHC-P e IF-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo, poiché l'epitopo peptidico può essere sensibile alle condizioni di fissazione e inclusione.
• Per l'ELISA, i formati di legame diretto o sandwich possono richiedere test di accoppiamento preliminari; la natura policlonale può fornire un'amplificazione del segnale ma può anche aumentare il background se non titolata con cura.

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