Anticorpo policlonale anti-GRASP65 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9BQQ3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GRASP65 (GORASP1)

• GRASP65 (GORASP1, GOLPH5) è una proteina strutturale chiave dell'apparato di Golgi, appartenente alla famiglia GORASP. Lo splicing alternativo produce multiple isoforme. (Parole chiave: Splicing alternativo)
• È necessario per la formazione e il mantenimento del nastro del Golgi, agendo in concerto con GORASP2/GRASP55. Gioca anche un ruolo nell'assemblaggio e nell'impilamento delle membrane dei cisterni e nella riassemblazione degli impilamenti del Golgi dopo la rottura mitotica.
  Riferimenti correlati:
  PMID:33301566
• Il clivaggio mediato da caspasi di GRASP65 è necessario per la frammentazione del Golgi durante l'apoptosi. (Per similarità)
• GRASP65 media, tramite interazione con GOLGA2/GM130, l'attracco delle vescicole di trasporto con le membrane del Golgi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:16489344
• Facilita il traffico non convenzionale indotto da stress ER del CFTR glicosilato di base verso la membrana cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:21884936
• A livello subcellulare, GRASP65 si localizza nell'apparato di Golgi, specificamente nella membrana della rete cis-Golgi e nella membrana del compartimento intermedio reticolo endoplasmatico-Golgi.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, miristoilazione e legame allo zinco. La proteina è una fosfoproteina, una lipoproteina e una proteina legante metalli.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 221–440 di GRASP65 umano, situati nella regione C-terminale. Quando si prevede il riconoscimento delle isoforme, considerare le varianti di splicing potenzialmente influenti su questo dominio.
• Per il Western blotting (WB), validare l'anticorpo in linee cellulari umane; il GRASP65 endogeno migra a circa 46 kDa. Durante l'apoptosi possono apparire frammenti di clivaggio: utilizzare controlli appropriati (es. cellule trattate con staurosporina).
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare la fissazione (es. metanolo o paraformaldeide) e la permeabilizzazione per ottenere una colorazione chiara del Golgi. Si raccomanda la colorazione concomitante con un marcatore del Golgi (es. GM130).
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; titolare per determinare la concentrazione ottimale per il sistema di saggio.

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