Anticorpo policlonale Anti-GRHL2 per WB e ELISA - Q6ISB3

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GRHL2

• GRHL2 (omologo della proteina Grainyhead-like 2), noto anche come Brother of mammalian grainyhead (BOM) o Fattore di trascrizione CP2-like 3, è un fattore di trascrizione che si lega alla sequenza consenso del DNA 5'-'AACCGGTT-3' e agisce sia come attivatore che come repressore dei geni bersaglio (Per similarità).
• Gioca un ruolo essenziale nella neurulazione primaria e nello sviluppo epiteliale; coopera con GRHL3 nell'istituire distinte zone di chiusura ed è essenziale per la chiusura rostrale del prosencefalo (PubMed:25152456, PubMed:29309642).
  Riferimenti correlati: PMID:25152456 PMID:29309642
• Come regolatore principale della morfogenesi epiteliale, GRHL2 up-regola i componenti delle giunzioni strette (CLDN3, CLDN4) e RAB25, migliorando la localizzazione di CLDN4; stabilisce anche appropriati livelli di espressione di CDH1 in vari epiteli (Per similarità).
• Esibisce ridondanza funzionale con GRHL3 nella morfogenesi epidermica e nella riparazione delle ferite; nel polmone, forma un loop regolatorio con NKX2-1 per coordinare la differenziazione delle cellule epiteliali (Per similarità).
• Nei cheratinociti, GRHL2 attiva la telomerasi legando il promotore TERT e inibendo la metilazione del DNA alla sua isola 5'-CpG, potenzialmente interferendo con l'attività di DNMT1 (PubMed:19015635, PubMed:20938050).
  Riferimenti correlati: PMID:19015635 PMID:20938050
• Al contrario, compromette la differenziazione dei cheratinociti reprimendo epigeneticamente i geni nel complesso di differenziazione epidermica (EDC) così come GRHL1 e GRHL3 (PubMed:23254293).
  Riferimenti correlati: PMID:23254293
• A livello subcellulare, GRHL2 si localizza nel nucleo e nella membrana, coerente con i suoi ruoli nella trascrizione e nella regolazione delle giunzioni cellulari.
• Altamente espresso nella placenta, prostata, cervello, rene e numerosi tessuti epiteliali; rilevato anche nelle cellule epiteliali della coclea e della cornea (PubMed:29499165). Le mutazioni in GRHL2 sono associate alla distrofia corneale (PPCD4), alla sordità non sindromica (DFNA28) e alla displasia ectodermica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 80–250 del GRHL2 umano (NP_079191.2), una regione che copre parte del dominio N-terminale. Questa sequenza è conservata nel ratto (reattività incrociata confermata), ma gli investigatori dovrebbero verificare la reattività in altre specie mediante allineamento delle sequenze.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto di GRHL2 è di ~71 kDa; tuttavia, modificazioni post-traduzionali o variazioni degli isoforme possono comportare bande aggiuntive. Ottimizzare i controlli di carico e le condizioni di bloccaggio.
• Nell'ELISA, considerare l'uso di una curva standard con peptide o proteina ricombinante per la quantificazione. A causa della natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere validata per risultati riproducibili.
• Quando si rileva GRHL2 endogeno in cellule o tessuti epiteliali (es. pelle, polmone, rene), i protocolli di estrazione nucleare possono arricchire il segnale. Validare la specificità tramite knockdown siRNA o test paralleli con linee cellulari negative note.

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