Anticorpo Monoclonale Anti-GRK2 [Validato KO] per WB, IF/ICC, ELISA - P25098

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GRK2

• GRK2 (chinasi dei recettori accoppiati a proteine G 2), noto anche come chinasi 1 del recettore beta-adrenergico (BARK1), è una serina/treonina chinasi che fosforila specificamente i recettori accoppiati a proteine G (GPCR) attivati, avviando l'internalizzazione e la desensibilizzazione del recettore mediate da β-arrestina (PubMed:14976224, PubMed:16179383, PubMed:19306925). Riferimenti correlati: PMID:14976224 PMID:16179383 PMID:19306925
• Fosforila la forma occupata dall'agonista dei recettori beta-adrenergici (ADRB2) e dei recettori correlati alle catecolamine, regolando le risposte della frequenza di contrazione dei cardiomiociti e promuovendo la desensibilizzazione del recettore (PubMed:19715378). Riferimenti correlati: PMID:19715378
• GRK2 desensibilizza i recettori delle anafilatossine C3AR1 e C5AR1 al legame del ligando, modulando le risposte delle cellule immunitarie (PubMed:21799898, PubMed:23077507). Riferimenti correlati: PMID:21799898 PMID:23077507
• Regola positivamente la via di segnalazione ciliare smoothened (SMO) fosforilando SMO (facilitando il suo traffico nel ciglio) e GPR161 (promuovendo la sua esportazione ciliare), eventi chiave nella segnalazione Hedgehog (PubMed:39138140, PubMed:40384633). Riferimenti correlati: PMID:39138140 PMID:40384633
• GRK2 modula la segnalazione LPAR1 competendo con RALA per il legame al recettore, influenzando le proprietà di segnalazione e desensibilizzando LPAR1/LPAR2 in modo indipendente dalla fosforilazione (PubMed:19306925). Riferimenti correlati: PMID:19306925
• A livello subcellulare, GRK2 si localizza nel citoplasma, nella membrana cellulare, nelle proiezioni cellulari (inclusa la membrana ciliare) e nei compartimenti sinaptici (postsinapsi e presinapsi), riflettendo i suoi diversi ruoli regolatori.
• L'espressione tissutale viene rilevata nei leucociti del sangue periferico, sottolineando la sua importanza nei sistemi immunitario e cardiovascolare.
• Le caratteristiche molecolari chiave includono il legame all'ATP, il legame ai nucleotidi, l'attività chinasica, la fosforilazione e l'attività transferasica, come annotato in UniProt.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno dei residui 590–689, suggerendo il riconoscimento di un epitopo lineare; il Western blotting denaturante (WB) e l'ELISA dovrebbero funzionare bene.
• La validazione KO indica un'alta specificità; considerare l'uso di lisati cellulari con knockout di GRK2 come controllo negativo nel WB per confermare l'identità della banda.
• È prevista una banda a ~80 kDa; validare la sua migrazione nel sistema di campione utilizzando marcatori di peso molecolare appropriati.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), GRK2 mostra colorazione membranare e citoplasmatica; assicurare un'adeguata permeabilizzazione e considerare la colorazione combinata con marcatori organellari.
• La reattività incrociata con topo e ratto rende questo anticorpo adatto per studi in organismi modello comuni; verificare il segnale nei tessuti o linee cellulari rilevanti.
• Poiché GRK2 è coinvolto nella desensibilizzazione dei GPCR, gli assay funzionali (es. internalizzazione del recettore o reclutamento di β-arrestina) possono completare gli esperimenti di rilevamento.

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