Anticorpo Policlonale Anti-GRK5 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34947

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GRK5

• Codificata dal gene GRK5 (noto anche come GPRK5), GRK5 è un membro della famiglia delle chinasi dei recettori accoppiati a proteine G (GRK) che fosforila specificamente i GPCR attivati, avviando desensibilizzazione e internalizzazione tramite il reclutamento della beta-arrestina.
• Oltre ai GPCR, GRK5 fosforila numerosi substrati non recettoriali tra cui ST13 (regola il traffico del recettore delle chemochine), TP53/p53 (inibisce l'apoptosi), HDAC5 (promuove l'esportazione nucleare e potenzia la trascrizione mediata da MEF2), ARRB1 e persino LRP6 nella segnalazione Wnt.
• A livello subcellulare, GRK5 si localizza dinamicamente nel citoplasma, nel nucleo e sulla membrana cellulare, in linea con i suoi ruoli nella regolazione dei recettori di membrana e nella modulazione trascrizionale nucleare.
• La distribuzione tissutale è ampia ma arricchita: i livelli più alti si rilevano nel cuore, nella placenta e nel polmone, con espressione moderata nel muscolo scheletrico, cervello, fegato, pancreas e rene.
• L'attività chinasica è ATP-dipendente e la proteina contiene domini leganti lipidi, che ne consentono l'associazione alla membrana; è inoltre una fosfoproteina soggetta a modificazioni regolatorie.
• Parole chiave funzionali includono segnalazione dell'apoptosi, coinvolgimento nella via Wnt e attività chinasica serina/treonina, sottolineando i suoi ruoli multifunzionali nella segnalazione cellulare e nelle malattie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, preparare lisati cellulari totali da tessuti con alta espressione di GRK5 (es. cuore, polmone). Ci si aspetta una banda a circa 68 kDa in condizioni riducenti; validare con un lisato di controllo positivo.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), può essere impiegata una comune procedura di recupero dell'antigene (es. buffer citrato pH 6.0); includere tessuti noti positivi come il muscolo cardiaco e controlli negativi per valutare la specificità.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), possono essere utilizzate linee cellulari che esprimono endogenamente GRK5. Le condizioni di fissazione/permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate e studi di co-localizzazione con marcatori di membrana o nucleari possono confermare la dinamica di localizzazione.
• Essendo un anticorpo policlonale, si raccomanda di verificare la consistenza tra lotto e lotto per saggi quantitativi come l'ELISA. Utilizzare proteina GRK5 ricombinante come standard.

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