Anticorpo Policlonale Anti-GRM1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13255

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GRM1

• GRM1 codifica per il recettore metabolotropico del glutammato 1, un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) attivato dal glutammato, il principale neurotrasmettitore eccitatorio nel sistema nervoso centrale.
• Dopo il legame del ligando, GRM1 si accoppia alle proteine G e attiva un sistema di secondi messaggeri fosfatidilinositolo-calcio, svolgendo ruoli critici nella plasticità sinaptica come la potenziazione a lungo termine (LTP) nell'ippocampo e la depressione a lungo termine (LTD) nel cervelletto (PubMed:24603153, PubMed:28886343, PubMed:7476890).
  Riferimenti correlati: PMID:24603153 PMID:28886343 PMID:7476890
• Nei neuroni dopaminergici e nelle cellule di Purkinje del cervelletto, la segnalazione di GRM1 tramite la via GNAQ-PLC-PKC induce l'attivazione dei canali cationici di GRID1 e GRID2, rispettivamente (PubMed:24357660, PubMed:27276689).
  Riferimenti correlati: PMID:24357660 PMID:27276689
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare, specificamente arricchita nei siti postsinaptici e nelle proiezioni dendritiche, in linea con il suo ruolo nella trasmissione sinaptica.
• GRM1 subisce uno splicing alternativo, generando isoforme che possono esibire proprietà di segnalazione distinte. Mutazioni in questo gene sono associate a disturbi neurosviluppativi e neurodegenerativi, comprese le atassie spinocerebellari di tipo SCA44 e SCAR13.
• Il recettore è espresso prevalentemente nel tessuto cerebrale, dove modula l'eccitabilità neuronale e la forza sinaptica.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e formazione di ponti disolfuro, essenziali per il ripiegamento del recettore, il traffico di membrana e la modulazione del segnale.
• Come GPCR di Classe C, GRM1 presenta un ampio dominio N-terminale extracellulare contenente il modulo "venus flytrap" per il legame del ligando, connesso al nucleo a 7 eliche transmembrana, e una coda C-terminale intracellulare coinvolta nelle interazioni proteiche e nella regolazione della segnalazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale intracellulare (amminoacidi 920–1140) del GRM1 umano (isoforma NP_001264993.1). Questa regione è distante dai domini transmembrana, rendendo l'anticorpo adatto a rilevare i livelli proteici totali di GRM1 in condizioni denaturanti e native.
• Per il Western blotting (WB), ci si aspetta una banda intorno a 132 kDa; considerare l'uso di lisati cellulari totali da tessuto cerebrale o linee cellulari neuronali (es. SH-SY5Y, neuroni primari) e verificare la specificità con controlli di sovraespressione o knockout di GRM1.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), prevedere pattern di colorazione della membrana plasmatica e dendritici; la co-localizzazione con marcatori sinaptici (es. PSD-95) può aiutare a confermare la localizzazione postsinaptica.
• Quando si utilizza l'ELISA, considerare il design della coppia di anticorpi e testare la reattività crociata con altri membri della famiglia mGluR (es. GRM5) se necessario, a causa della conservazione della sequenza nella regione C-terminale.
• Convalidare l'anticorpo nel vostro specifico sistema campione, poiché modifiche post-traduzionali e la formazione di complessi proteici possono influenzare il rilevamento.

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