Anticorpo policlonale anti-GSDMC di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q9BYG8

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Gasdermina-C

• La Gasdermina-C (GSDMC), nota anche come fattore extranucleare contenente leucina a cerniera derivato dal melanoma (MLZE), è il precursore di una proteina che forma pori e innesca la piroptosi dopo la clivaggio.
  Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:32929201, PMID:34012073
• Il clivaggio della gasdermina-C da parte della caspasi CASP8 in risposta a segnali di morte rilascia la porzione N-terminale che forma pori, la quale si transloca alla membrana plasmatica.
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• Il frammento N‑terminale si lega fortemente ai lipidi del foglietto interno della membrana e forma omo-oligomeri per creare pori con diametro interno di 10–15 nm, portando alla permeabilizzazione della membrana e alla morte cellulare piroptotica.
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• In condizioni basali, la gasdermina-C si localizza prevalentemente nel citoplasma, ma dopo l'attivazione si inserisce nella membrana cellulare come un poro transmembrana a β-strand.
• L'espressione tissutale è più alta nella trachea e nella milza, con espressione aggiuntiva nelle cellule esofagee differenziate e nell'epitelio gastrico.
• La proteina è soggetta a palmitoilazione ed è annotata con parole chiave tra cui necrosi, lipoproteina e β-strand transmembrana, sottolineando il suo ruolo nella morte cellulare regolata.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–100 di GSDMC umano; pertanto, l'anticorpo può riconoscere sia la forma a lunghezza intera (∼58 kDa) sia il frammento N‑terminale clivato. Quando si esegue un Western blot, considerare l'uso di lisati da cellule attivate dalle caspasi per distinguere i prodotti di clivaggio.
• Le applicazioni consigliate includono WB, IF/ICC ed ELISA. Per WB, validare in linee cellulari con espressione confermata di GSDMC, come quelle derivate dalla trachea, dalla milza o dall'epitelio gastrico.
• In IF/ICC, prevedere una colorazione citoplasmatica in condizioni di riposo e una potenziale translocazione di membrana dopo stimolazione piroptotica. Ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare i segnali legati alla membrana.
• Per ELISA, utilizzare proteina ricombinante GSDMC o standard peptidici per stabilire la sensibilità e la specificità dell'analisi. Includere controlli appropriati per tenere conto degli effetti matrice dei fluidi biologici rilevanti.

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