Anticorpo Policlonale Anti-GSDMD per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P57764

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GSDMD

• GSDMD è una proteina precursore formante pori e un esecutore chiave della piroptosi a valle dell'attivazione dell'inflammasoma.
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• La scissione proteolitica da parte di caspase‑1, ‑4 o ‑5 rilascia il dominio N‑terminale, che si oligomerizza formando pori di 10–15 nm nella membrana plasmatica.
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• Questi pori mediano la secrezione di IL‑1β e IL‑18 mature, innescando la morte cellulare infiammatoria (piroptosi).
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• Il frammento N‑terminale si lega specificamente a fosfolipidi acidi come cardiolipina, fosfatidilinositolo fosfati, acido fosfatidico e fosfatidilserina, ma non a lipidi neutri.
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• GSDMD esercita un'attività battericida diretta formando pori sia su batteri Gram‑positivi che Gram‑negativi.
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• La scissione da parte dell'allergene papaina genera un frammento che rilascia selettivamente IL‑33, guidando l'immunità di tipo 2.
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• Una variante di scissione dipendente da caspase‑3/7 nell'intestino tenue agisce come un coattivatore trascrizionale, promuovendo la tolleranza immunitaria tramite l'induzione di CIITA e MHC‑II.
• GSDMD è espressa abbondantemente nelle cellule epiteliali in differenziazione dell'esofago e dello stomaco, e si localizza nel citosol, nell'inflammasoma, nella membrana plasmatica, nei mitocondri e nel nucleo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 346–484 di GSDMD umano, bersagliando la porzione C‑terminale; pertanto l'anticorpo riconosce la forma a lunghezza intera (~53 kDa) e il frammento C‑terminale generato dalla scissione della caspasi (~30 kDa), ma non il dominio N‑terminale formante pori.
• Nel Western blot, ci si aspetta una banda dominante a circa 53 kDa; in seguito all'attivazione dell'inflammasoma, può essere visibile anche una banda più piccola (~30 kDa) che rappresenta il prodotto di scissione C‑terminale.
• Per l'immunofluorescenza e l'immunoistochimica, ottimizzare fissazione e permeabilizzazione per rilevare GSDMD nelle sue molteplici localizzazioni subcellulari (citosol, membrana, mitocondri, nucleo).
• Questo anticorpo policlonale è ben adatto per l'immunoprecipitazione di GSDMD a lunghezza intera e dei suoi partner di legame.
• Nei sistemi ELISA, può fungere da anticorpo di cattura o di rilevamento; l'abbinamento con un anticorpo GSDMD specifico per il dominio N‑terminale consente di discriminare tra le forme intatte e quelle processate.

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