Anticorpo policlonale di coniglio Anti-GSDME (Lunghezza completa+terminale N) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60443

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della GSDME

• La GSDME (DFNA5/ICERE-1), codificata dal gene GSDME, è una proteina precursora porogenica della famiglia delle gasdermine che converte l'apoptosi non infiammatoria in piroptosi.
  Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:33852854
• Dopo la scissione da parte della caspasi-3 (CASP3) o della granzima B (GZMB), il frammento N-terminale si trasloca sulla membrana plasmatica, oligomerizza e forma pori con diametro interno compreso tra 10 e 15 nm, facilitando il rilascio di IL-1β e IL-18 e innescando la morte cellulare piroptotica.
  Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• La GSDME agisce come interruttore critico che converte l'apoptosi indotta da TNF o chemioterapia in piroptosi ed è coinvolta nella necrosi secondaria durante le infezioni virali.
  Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:28045099
• La proteina possiede attività battericida e contribuisce alla necrosi secondaria a valle della via apoptotica mitocondriale.
  Riferimenti correlati: PMID:27281216, PMID:28045099
• Come soppressore tumorale, la GSDME facilita la piroptosi mediata dalla granzima B nelle cellule tumorali, promuovendo così una solida immunità antitumorale e la regressione del tumore da parte delle cellule natural killer.
  Riferimenti correlati: PMID:21522185, PMID:32188940, PMID:31953257
• La GSDME è espressa nella coclea e in molti altri tessuti, con la massima espressione nella placenta; le mutazioni causano la perdita uditiva autosomica dominante non sindromica (DFNA5).
  Riferimenti correlati: PMID:9771715
• Lo splicing alternativo produce più isoforme con pesi molecolari di circa 11, 35 e 55 kDa.
• La GSDME full-length si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel citosol; dopo la scissione, il frammento N-terminale si associa alla membrana cellulare per svolgere la sua funzione porogenica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per l'analisi Western blot (WB), aspettarsi bande corrispondenti alle isoforme della GSDME a circa 11, 35 e 55 kDa. Utilizzare controlli positivi come linee cellulari trattate con induttori della piroptosi (ad es. agenti chemioterapici) per confermare la rilevazione specifica.
• Nell'immunistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione delle condizioni di recupero dell'antigene e permeabilizzazione. Se possibile, convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando il peptide di blocco o tessuti da modelli knockout.
• Per ELISA e altri saggi quantitativi, considerare l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo di rilevazione monoclonale corrispondente per una progettazione affidabile di un saggio sandwich.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, per esperimenti critici è necessario verificare la coerenza tra lotti. Si consiglia di eseguire controlli negativi appropriati (ad es. solo anticorpo secondario) per valutare la colorazione di fondo.

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