Anticorpo monoclonale Anti-GSK-3α/β per WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P49840/P49841

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GSK-3α/β

• GSK-3α e GSK-3β sono chinasi serina/treonina costitutivamente attive che fosforilano e inattivano la glicogeno sintasi (GYS1/GYS2), regolando negativamente la sintesi del glicogeno e l'omeostasi del glucosio.
  Riferimenti correlati: PMID:11749387, PMID:17478001, PMID:19366350
• Svolgono un ruolo centrale nella via di segnalazione Wnt/β-catenina fosforilando la β-catenina (CTNNB1), promuovendo la sua ubiquitinazione e degradazione proteasomiale, che inibisce la trascrizione dei geni bersaglio di Wnt.
  Riferimenti correlati: PMID:17229088
• GSK-3α contribuisce alla patogenesi del morbo di Alzheimer facilitando la processazione della proteina precursore dell'amiloide (APP) e la generazione di placche amiloidi neurotossiche.
  Riferimenti correlati: PMID:12761548
• Le chinasi sono coinvolte nella segnalazione insulinica: possono mediare lo sviluppo dell'insulino-resistenza regolando i fattori di trascrizione che controllano i geni metabolici.
  Riferimenti correlati: PMID:10868943, PMID:17478001
• GSK-3α regola l'autofagia fosforilando l'acetiltransferasi KAT5/TIP60 in condizioni di digiuno, che a sua volta acetila e attiva proteine chiave dell'autofagia come ULK1 e RUBCNL.
  Riferimenti correlati: PMID:30704899
• Entrambe le isoforme presentano un dominio chinasi N-terminale con siti di legame per l'ATP e nucleotidi, e la loro attività è modulata da chinasi a monte attraverso la fosforilazione in specifici residui di serina N-terminali (Ser21 per GSK-3α, Ser9 per GSK-3β). La disregolazione è associata a diabete, neurodegenerazione e cancro.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting, aspettati bande di circa 46 kDa (GSK-3α) e 48 kDa (GSK-3β) in lisati cellulari o tissutali di uomo, topo o ratto. Usa SDS-PAGE standard e membrane di nitrocellulosa/PVDF.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunistochimica (IHC), permeabilizza le cellule o deparaffina e recupera l'antigene dei tessuti in modo appropriato, poiché GSK-3α/β sono prevalentemente citoplasmatici ma possono anche localizzarsi nei nuclei. Convalida la specificità del segnale con controlli positivi e negativi noti.
• Per l'ELISA, valuta un formato sandwich che utilizzi questo anticorpo di cattura abbinato a un anticorpo di rilevamento che riconosca un epitopo diverso. Titra le concentrazioni di anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• L'immunogeno proteico ricombinante suggerisce che l'anticorpo può riconoscere sia le forme fosforilate che quelle non fosforilate. Verifica il riconoscimento dello stato di modificazione desiderato trattando i campioni con modulatori (es. insulina o Wnt3a per indurre la fosforilazione, o inibitori della fosfatasi per preservare gli stati endogeni).
• La reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto è riportata; in ogni caso, conferma sempre la reattività nel tuo sistema modello specifico, poiché i livelli di espressione e le modifiche post-traduzionali possono variare.

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