Anticorpo Monoclonale Anti-GSK3β per Citometria a Flusso (Intracellulare) - P49841

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GSK3β

• GSK3β è una serina/treonina chinasi costitutivamente attiva che agisce come regolatore negativo nel controllo ormonale dell'omeostasi del glucosio, nella segnalazione Wnt e nella regolazione di fattori di trascrizione e microtubuli, fosforilando substrati come la glicogeno sintasi, la β-catenina e la Tau. Riferimenti correlati: PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• Richiede la fosforilazione innescata della maggior parte dei substrati; nel muscolo scheletrico, fosforila e inibisce la glicogeno sintasi (GYS1), regolando la sintesi del glicogeno e potenzialmente contribuendo alla resistenza all'insulina. Riferimenti correlati: PMID:8397507 PMID:11430833 PMID:16484495
• Nella segnalazione Wnt, GSK3β forma un complesso con APC, AXIN1 e β-catenina, fosforilando la β-catenina per promuoverne la degradazione mediata dall'ubiquitina. Riferimenti correlati: PMID:12554650
• GSK3β fosforila la Tau (MAPT) a livello di Thr-548, riducendo il legame con i microtubuli; la Tau è un componente principale dei grovigli neurofibrillari nella malattia di Alzheimer, e GSK3β si collocalizza con la Tau e PKR nei cervelli di pazienti con Alzheimer. Riferimenti correlati: PMID:14690523
• Regola l'orologio circadiano fosforilando le proteine centrali dell'orologio BMAL1, CLOCK e PER2, indirizzandole alla degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:19946213 PMID:28903391
• GSK3β si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare; è espressa in modo elevato in testicolo, timo, prostata, ovaio e debolmente in polmone, cervello, rene. Il gene subisce splicing alternativo e la proteina è modificata da fosforilazione, ADP-ribosilazione e palmitoilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo bersaglia un epitopo intracellulare; per la citometria a flusso intracellulare sono necessari fissazione e permeabilizzazione. Ottimizzare le condizioni di permeabilizzazione per il proprio tipo cellulare.
• Validare l'espressione di GSK3β nelle linee cellulari rilevanti (ad es. HEK293, HeLa) utilizzando controlli positivi e negativi per confermare la specificità della marcatura.
• Utilizzare appropriati controlli isotipo e titolare l'anticorpo coniugato per minimizzare il fondo e ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Poiché l'immunogeno comprende gli amminoacidi 321-420 vicino al C-terminale, assicurarsi che l'accessibilità dell'epitopo non sia mascherata da interazioni proteiche o modifiche.
• Controllare le impostazioni di compensazione se si utilizza in pannelli multicolore; fare riferimento alle guide sulla sovrapposizione spettrale dei fluorofori.
• Non sono forniti dati di reattività crociata; verificare la compatibilità con la specie bersaglio o la linea cellulare di interesse.

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