Anticorpo policlonale anti-GSK3β di coniglio per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P49841

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GSK3β

• GSK3β (GSK3B; gsk-3β) è una serina/treonina chinasi costitutivamente attiva che regola negativamente la glicogeno sintasi (GYS1/GYS2), il fattore di inizio della traduzione EIF2B, i componenti della via Wnt (CTNNB1/beta-catenina, APC, AXIN1) e le proteine associate ai microtubuli (MAPT/TAU, MACF1). Riferimenti correlati: PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• Nella segnalazione dell'insulina, GSK3β fosforila e inibisce GYS1, regolando così la sintesi del glicogeno; controlla anche l'attività di EIF2B, modulando la sintesi proteica. Riferimenti correlati: PMID:8397507
• Nella via Wnt, GSK3β forma un complesso con APC, AXIN1 e beta-catenina, fosforilando l'estremità N-terminale della beta-catenina e indirizzandola alla degradazione mediata da ubiquitina-proteasoma. Riferimenti correlati: PMID:12554650
• GSK3β fosforila molteplici fattori di trascrizione, tra cui JUN (riducendo la sua affinità per il DNA), NFATC (promuovendo l'esportazione nucleare) e SNAI1 (promuovendo la sua degradazione). Regola anche l'orologio circadiano fosforilando BMAL1, CLOCK e PER2. Riferimenti correlati: PMID:1846781 PMID:9072970 PMID:15448698 PMID:15647282 PMID:25827072 PMID:19946213 PMID:28903391
• Nei neuroni, GSK3β è essenziale per l'instaurazione della polarità e la crescita degli assoni, e fosforila MAPT/TAU su 'Thr-548', riducendo il legame con i microtubuli; l'iperfosforilazione di TAU è una caratteristica distintiva della malattia di Alzheimer. Riferimenti correlati: PMID:20067585 PMID:14690523
• GSK3β partecipa alla regolazione dell'autofagia fosforilando KAT5/TIP60 in condizioni di digiuno, promuovendo l'acetilazione dei principali regolatori dell'autofagia; modula anche l'apoptosi attraverso un complesso anti-apoptotico con DDX3X e BRIC2 ai recettori di morte. Riferimenti correlati: PMID:30704899 PMID:18846110
• Localizzato a livello subcellulare nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare, GSK3β subisce molteplici modifiche post-traduzionali (fosforilazione, ubiquitinazione, palmitoilazione) ed è associato al diabete mellito, alla malattia di Alzheimer e ai ritmi circadiani.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 320-420 nella regione C-terminale di GSK3β umano; questa regione è conservata nel topo e nel ratto, coerente con la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è 47 kDa. La fosforilazione o lo splicing alternativo possono causare spostamenti delle bande; considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi o la verifica con un controllo di carico.
• GSK3β è una chinasi pleiotropica; convalidare il rilevamento nel modello cellulare o tissutale specifico utilizzando inibitori noti (es. CHIR99021) o knockdown con siRNA.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), l'accessibilità dell'epitopo può variare con il metodo di fissazione; testare la permeabilizzazione con metanolo rispetto a paraformaldeide.
• Gli anticorpi policlonali possono fornire un segnale robusto in IP ed ELISA, ma la coerenza tra i lotti deve essere confermata per le applicazioni quantitative.

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