Anticorpo policlonale anti-GSTM3 per WB, IF/ICC, ELISA - P21266

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della GSTM3

• GSTM3 codifica per la glutatione S-transferasi Mu 3 (GST classe-mu 3), nota anche come hGSTM3-3, un membro della famiglia GST mu degli enzimi di disintossicazione di fase II.
• La funzione primaria della GSTM3 è catalizzare la coniugazione del glutatione ridotto con un ampio spettro di elettrofili idrofobici esogeni ed endogeni, facilitandone l'eliminazione.
• La GSTM3 può svolgere un ruolo specializzato nelle barriere emato-testicolare ed emato-encefalica, regolando l'assorbimento e la disintossicazione di xenobiotici e composti endogeni in questi tessuti.
• La proteina è espressa prevalentemente nel citoplasma delle cellule testicolari e cerebrali, coerentemente con le sue funzioni di disintossicazione legate alle barriere.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di legami isopeptidici e la coniugazione di tipo ubiquitina (Ubl), che possono regolare l'attività, la localizzazione o la stabilità dell'enzima.
• La GSTM3 appartiene al proteoma di riferimento di Homo sapiens ed è stata identificata in numerosi studi proteomici.
• L'enzima contiene un sito cataliticamente attivo che lega il glutatione e i substrati idrofobici, tipico della superfamiglia GST.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 101-225 all'interno della regione C-terminale conservata della GSTM3 umana; questa sequenza è altamente omologa tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività crociata riportata.
• Per l'analisi Western blot, attendersi una banda a circa 27 kDa nei campioni ridotti. Includere controlli positivi come lisati di tessuto testicolare o cerebrale, dove la GSTM3 è arricchita.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), utilizzare condizioni di fissazione e permeabilizzazione adatte alle proteine citoplasmatiche. Convalidare la specificità con controlli appropriati, incluse cellule note per esprimere GSTM3.
• Quando si esegue un ELISA, considerare l'utilizzo di uno standard di proteina GSTM3 ricombinante per la quantificazione. L'anticorpo può essere utilizzato sia in formati ELISA diretti che indiretti, ma si consiglia l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevamento.
• Poiché la GSTM3 è un enzima di disintossicazione, la sua espressione può essere modulata da xenobiotici o stress cellulare; considerare il trattamento dei campioni con induttori rilevanti se si prevedono bassi livelli endogeni.

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