Anticorpo monoclonale anti-Guanylyl Ciclasi beta 1 (GUCY1B3) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q02153

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Guanylyl Ciclasi beta 1

• La subunità beta-1 della guanilato ciclasi solubile (GUCY1B3) è il prodotto proteico del gene GUCY1B1; è anche nota come GCS-beta-3, subunità piccola della guanilato ciclasi solubile e Guanylyl Ciclasi beta 1.
• Questa subunità forma un eterodimero con una subunità alfa per costituire la guanilato ciclasi solubile, il recettore primario per l'ossido nitrico (NO). Dopo il legame con NO, l'enzima catalizza la conversione del GTP in cGMP, un importante secondo messaggero che media la vasodilatazione, la neurotrasmissione e altri processi fisiologici.
• GUCY1B3 è un membro della famiglia adenylyl ciclasi-4/guanylyl ciclasi e contiene un dominio legante l'eme che rileva NO, una regione centrale GTPasi e un dominio catalitico della ciclasi.
• A livello subcellulare, la proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma, in linea con il suo ruolo di enzima solubile.
• I dati di specificità tissutale indicano espressione nel cervello, in particolare nella corteccia e nel cervelletto, dove la segnalazione ossido nitrico-cGMP regola la plasticità sinaptica e la funzione neuronale.
• Sebbene il record UniProt elenchi lo splicing alternativo come parola chiave, non sono descritte isoforme specifiche per questa subunità oltre alla sequenza canonica.
• Le parole chiave associate a GUCY1B3 includono struttura 3D, biosintesi del cGMP, citoplasma, eme, ferro, legame metallico e legame GTP, riflettendo le sue proprietà enzimatiche e regolatorie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno consiste in un peptide sintetico che copre la regione N-terminale (amminoacidi 1–100), suggerendo il rilevamento di GUCY1B3 a lunghezza intera; verificare la specificità con controlli appropriati.
• Per il Western blot, la banda target è attesa a circa 71 kDa (peso molecolare canonico ~70.5 kDa); considerare l'uso di condizioni riducenti e non riducenti per valutare potenziali artefatti di dimerizzazione.
• Nell'IHC-P, ottimizzare i protocolli di recupero dell'antigene e validare i pattern di colorazione in tessuti positivi come la corteccia cerebrale e il cervelletto, che esprimono GUCY1B3 a livelli rilevabili.
• Gli esperimenti IF/ICC dovrebbero produrre un segnale citoplasmatico; studi di co-localizzazione con marcatori di organelli possono aiutare a confermare la distribuzione subcellulare.
• Le applicazioni ELISA possono utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento; abbinare con un anticorpo anti-subunità alfa o anti-GUCY1B3 da un ospite diverso per saggi sandwich.
• Data la reattività incrociata con topo e ratto, questo anticorpo è adatto per studi in modelli di roditori comuni; tuttavia, convalidare le prestazioni nel tessuto o nella linea cellulare di ciascuna specie a causa di possibili variazioni di sequenza.
• Poiché l'attività della guanilato ciclasi solubile dipende dall'eme e dall'NO, considerare se le tue condizioni sperimentali (ad esempio, stimolazione cellulare con donatori di NO) potrebbero influenzare l'accessibilità dell'epitopo o la conformazione proteica.

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