Anticorpo monoclonale di coniglio anti-GZMA per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P12544

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Granzyma A

• La Granzyma A (GZMA), nota anche come triptasi dei linfociti T citotossici, fragmentina-1 e fattore di Hanukkah (HF), è una serin-proteasi espressa abbondantemente nei granuli citosolici delle cellule T citotossiche e delle cellule NK.
• Dopo essere stata introdotta nelle cellule bersaglio attraverso la sinapsi immunologica, la GZMA induce la piroptosi indipendente dalle caspasi mediante la scissione della gasdermina-B (GSDMB), liberando il suo dominio in grado di formare pori e inducendo la lisi delle cellule bersaglio (PubMed:32299851, PubMed:34022140, PubMed:36157507).
  Riferimenti correlati:
  PMID:32299851 PMID:34022140 PMID:36157507
• Scinde i residui di lisina o arginina (PubMed:12819770, PubMed:32299851).
  Riferimenti correlati:
  PMID:12819770 PMID:32299851
• Tra gli ulteriori substrati figurano l'enzima di riparazione ossidativa APEX1, scisso in Lys-31 (PubMed:12524539), e la proteina di assemblaggio dei nucleosomi SET, scissa in Lys-189 per promuovere la degradazione del DNA (PubMed:11555662, PubMed:12628186, PubMed:16818237).
  Riferimenti correlati:
  APEX1: PMID:12524539
  SET: PMID:11555662 PMID:12628186 PMID:16818237
• La GZMA è localizzata nei granuli citoplasmatici e viene secreta nella sinapsi immunologica al riconoscimento della cellula bersaglio.
• La proteina è una glicoproteina contenente ponti disolfuro e viene inizialmente sintetizzata come zimogeno inattivo, che richiede un'elaborazione proteolitica per l'attivazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blot, si prevede una banda di circa 29 kDa in condizioni riducenti; validare l'anticorpo in linee cellulari umane pertinenti, come cellule T citotossiche o cellule NK.
• Quando si eseguono l'immunofluorescenza o l'immunocitochimica, considerare la permeabilizzazione per visualizzare la colorazione citoplasmatica granulare.
• Per l'immunoprecipitazione e l'ELISA, ottimizzare la diluizione dell'anticorpo nella matrice specifica del campione.
• Assicurarsi di includere controlli positivi e negativi appropriati, ad esempio linee cellulari che esprimono GZMA e linee cellulari knockout, per confermare la specificità.

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