Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-GZMA per WB, IF/ICC, ELISA - P12544

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Granzima A

• La granzima A, nota anche come triptasi CTL, fragmentina-1, fattore Hanukkah (HF) e codificata dal gene GZMA (CTLA3, HFSP), è un'abbondante serin proteasi presente nei granuli citoplasmatici delle cellule T citotossiche e delle cellule natural killer (NK).
• Induce piroptosi indipendente da caspasi nelle cellule bersaglio dopo essere stata rilasciata tramite la sinapsi immunologica, clivando dopo residui di Lis o Arg. Riferimenti correlati: PMID:12819770, PMID:32299851, PMID:3257574
• Una volta all'interno della cellula bersaglio, GZMA cliva la gasdermina-B (GSDMB), rilasciando la sua componente formante pori per innescare piroptosi e morte cellulare. Riferimenti correlati: PMID:32299851, PMID:34022140, PMID:36157507
• Cliva anche APEX1 dopo la Lis-31, distruggendo la sua attività di riparazione ossidativa. Riferimenti correlati: PMID:12524539
• GZMA cliva la proteina di assemblaggio del nucleosoma SET dopo la Lis-189, interrompendo l'assemblaggio del nucleosoma e permettendo al complesso SET di migrare nel nucleo per incidere e degradare il DNA. Riferimenti correlati: PMID:11555662, PMID:12628186, PMID:16818237
• A livello subcellulare, la granzima A è localizzata nei granuli citoplasmatici ed è secreta in seguito a degranulazione.
• Come glicoproteina legata da ponti disolfuro, è inizialmente prodotta come zimogeno ed è una serin proteasi ben caratterizzata con strutture 3D disponibili.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, ci si aspetta una banda di circa 29 kDa; convalidare il rilevamento utilizzando lisati di controllo positivo da cellule T citotossiche attivate o linee cellulari NK.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, è necessaria la permeabilizzazione per rilevare GZMA citoplasmatica granulare. Una colorazione congiunta con perforina o CD8 può confermare la specificità per le cellule citotossiche.
• Quando si esegue l'ELISA, considerare l'uso di GZMA umana ricombinante come standard e verificare la linearità nella matrice del campione rilevante.
• Questo anticorpo mostra reattività incrociata con GZMA di topo e ratto, ma si consiglia l'allineamento delle sequenze della regione immunogena se sono necessari confronti quantitativi interspecie.

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