Monoclonal Antibodies
Anticorpo Monoclonale Anti-HADHB (Coniglio) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55084
Numero articolo : CM0012724
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- Applicazione
- WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA
- Reattività Crociata
- Umano, Mouse, Rat
- Peso Proteico
- 51kDa
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Specifiche e Parametri Principali del Prodotto
| Parametro | Valore |
|---|---|
| Nome Prodotto | [KD Validated] HADHB Rabbit mAb |
| Note/Alias | ECHB; MTPB; MTPD; MTPD2; MSTP029; TP-BETA; HADHB |
| Specie | Umano |
| ID Gene (Umano) | 3032 |
| ID Gene | 3032 |
| Immunogeno | Proteina di fusione ricombinante contenente una sequenza corrispondente agli amminoacidi 331-474 di HADHB umano (NP_000174.1) |
| Sorgente | Coniglio |
| Categoria | Anticorpi Monoclonali |
| Applicazione | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA |
| Reattività Incrociata | Umano, Topo, Ratto |
| SWISS | P55084 |
| Peso Proteico | 51kDa |
| Spedizione | Sacca di ghiaccio |
Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Subunità beta dell'enzima trifunzionale, mitocondriale
- HADHB (TP-beta) codifica per la subunità beta dell'enzima trifunzionale mitocondriale, un complesso eterotetramerico che catalizza gli ultimi tre passaggi della β-ossidazione degli acidi grassi a catena lunga. La subunità alfa (HADHA) contribuisce con le attività enoil-CoA idratasi e idrossiacil-CoA deidrogenasi, mentre HADHB esegue la tiolisi del 3-chetoacil-CoA. Riferimenti correlati: PMID:16423905, PMID:26474213, PMID:29915090
- Ogni ciclo di β-ossidazione rimuove due atomi di carbonio dalla catena di acil-CoA grasso, producendo acetil-CoA, FADH₂ e NADH. Questi trasportatori di elettroni guidano la sintesi di ATP attraverso il ciclo dell'acido citrico e la fosforilazione ossidativa, soddisfacendo le elevate richieste energetiche in tessuti come cuore e muscolo. Riferimenti correlati: PMID:26474213, PMID:29915090
- L'enzima trifunzionale agisce preferenzialmente su substrati a catena lunga, inclusi acidi grassi saturi come palmitato e laurato. Evidenze sperimentali confermano l'attività tiolasica contro substrati selezionati, e il suo meccanismo catalitico suggerisce attività su acidi grassi insaturi come oleato, linoleato e linolenato. Riferimenti correlati: PMID:1550553, PMID:8135828, PMID:8163672, PMID:30850536
- HADHB si localizza nella membrana mitocondriale interna, membrana mitocondriale esterna e reticolo endoplasmatico, indicando un ruolo dinamico nel metabolismo lipidico attraverso i siti di contatto degli organelli.
- Le modificazioni post-traduzionali includono l'acetilazione, e lo splicing alternativo genera multiple isoforme. Mutazioni in HADHB sono associate alla carenza della proteina trifunzionale mitocondriale, un grave disturbo metabolico.
- La proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 51.3 kDa (osservato ~51 kDa) ed è conservata tra umano, topo e ratto.
Guida Sperimentale e Consigli Tecnici
- L'immunogeno comprende gli amminoacidi 331–474 di HADHB umano, una regione conservata in topo e ratto; questo probabilmente spiega la reattività cross-specie riportata. Per esperimenti specie-specifici, confermare l'allineamento delle sequenze e validare il rilevamento nei lisati tissutali rilevanti.
- Per il Western blot, considerare l'uso di frazioni arricchite di mitocondri da tessuto cardiaco o epatico e una diluizione dell'anticorpo primario consigliata tra 1:1000 e 1:5000, ottimizzando per il proprio tipo di campione.
- Nell'IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene (es. buffer citrato, pH 6.0). Includere un controllo tissutale positivo noto come il muscolo cardiaco.
- Per IF/ICC, è consigliabile una co-colorazione con un marcatore mitocondriale (es. TOM20) per verificare la localizzazione. Potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione con Triton X-100 o digitonina.
- Quando utilizzato in ELISA, abbinare a un anticorpo di rilevamento corrispondente per saggi sandwich. Valutare la reattività incrociata con altri membri della famiglia delle tiolasi, se rilevante.
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Scheda Tecnica del Prodotto
Anticorpo Monoclonale Anti-HADHB (Coniglio) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55084
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