Anticorpo policlonale coniglio Anti-HAGH per WB, IF/ICC, ELISA - Q16775

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della HAGH

• Il gene HAGH codifica per l'idrossiacilglutatione idrolasi, un enzima mitocondriale e citoplasmatico noto anche come glioxalasi II (Glx II).
• L'enzima agisce come tiolesterasi, catalizzando l'idrolisi della S-D-lattoil-glutatione in glutatione e acido D-lattico: un passaggio fondamentale nella via della glioxalasi per la detossificazione del metilgliossale.
• HAGH appartiene alla superfamiglia delle metallo-beta-lattamasi e richiede ioni zinco per la sua attività catalitica; il legame dello zinco al sito attivo è essenziale per la sua funzione.
• La localizzazione subcellulare include la matrice mitocondriale e il citoplasma, coerente con il suo ruolo in entrambi i compartimenti per il metabolismo degli alfa-ossoaldeidi tossici.
• Lo splicing alternativo e l'iniziazione alternativa della traduzione generano più isoforme, che contribuiscono alla diversità funzionale e alla regolazione tessuto-specifica.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione; la proteina è stata identificata tramite sequenziamento proteico diretto e approcci di proteomica.
• L'espressione tissutale è particolarmente marcata nel fegato e nel rene, organi con un'attività di detossificazione elevata.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–260 della HAGH umana, comprendendo una larga porzione della proteina: questo può aiutare a generare anticorpi che riconoscono molteplici epitopi.
• Per il western blot, è attesa una banda intorno a 34 kDa; se si mira alla frazione mitocondriale, si raccomanda di ottimizzare la preparazione del lisato per preservare le frazioni mitocondriali.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica, includere controlli appropriati per confermare il pattern di colorazione mitocondriale o citoplasmatica, a seconda del tipo cellulare e delle condizioni di fissazione.
• Le prestazioni in ELISA devono essere validate con proteina ricombinante o controlli positivi noti, poiché gli anticorpi policlonali possono presentare variabilità tra lotti; la reattività incrociata con gli omologhi di topo e ratto può essere sfruttata per saggi su più specie.

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