Anticorpo policlonale coniglio anti-HAO1/GOX per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9UJM8

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HAO1/GOX

• HAO1/GOX, noto anche come glicolato ossidasi (GOX) o gossilato ossidasi, è un enzima perossisomiale che appartiene alla famiglia delle ossidasi acido (S)-2-idrossico.
• Esibisce una ampia specificità di substrato, ossidando preferenzialmente il glicolato con alta efficienza catalitica. Riferimenti correlati: PMID:10777549 PMID:10978532 PMID:17669354
• L'ossidazione del glicolato produce gossilato, che viene poi utilizzato dalla alanina-gossilato aminotransferasi per la sintesi perossisomiale della glicina, fungendo da passaggio critico nella detossificazione del gossilato per prevenire l'accumulo di ossalato e la formazione di calcoli renali. Riferimenti correlati: PMID:10978532 PMID:17669354
• Oltre al glicolato, può anche ossidare il gossilato e acidi idrossilici a catena lunga come 2-idrossiesadecanoato e 2-idrossioctanoato, sebbene con minore efficienza catalitica. Riferimenti correlati: PMID:10777549 PMID:17669354 PMID:18215067
• L'enzima utilizza ossigeno molecolare (O2) come accettore di elettroni fisiologico, generando perossido di idrogeno (H2O2) nel processo, ma può anche trasferire elettroni ad accettori artificiali come 2,6-diclorofenolindofenolo (DCIP) in vitro. Riferimenti correlati: PMID:10777549 PMID:10978532 PMID:17669354
• HAO1/GOX non mostra attività contro L-lattato o 2-idrossibutanoato. Riferimenti correlati: PMID:10777549
• È localizzato nella matrice dei perossisomi ed è altamente espresso nel fegato.
• La proteina è una flavoproteina che lega FMN ed è nota per essere fosforilata, come identificato negli studi di proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-370 di HAO1/GOX umano, che rappresenta quasi l'intera lunghezza della proteina e si prevede che generi anticorpi che riconoscono più epitopi.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è 41 kDa, ma le modifiche post-traduzionali o gli isoforme possono causare lievi spostamenti; convalidare utilizzando controlli positivi come lisati di fegato umano.
• Nell'immunofluorescenza (IF) e nell'immunoistochimica (IHC), considerare la colorazione combinata con marcatori perossisomiali (es. PMP70) per confermare la localizzazione peroxisomiale, e utilizzare sezioni di tessuto epatico note per esprimere alti livelli di HAO1.
• L'anticorpo ha riportato reattività crociata con il mouse e il ratto, rendendolo adatto per studi in questi organismi modello; convalidare la reattività nel proprio sistema di campioni specifico prima di esperimenti su larga scala.
• Come anticorpo policlonale, le prestazioni possono variare tra i lotti; considerare l'inclusione di controlli appropriati e l'ottimizzazione delle diluizioni per ogni applicazione.

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