Anticorpo policlonale di coniglio anti-HBGP1 per WB, ELISA - P69891

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della subunità gamma-1 dell'emoglobina

• La subunità gamma-1 dell'emoglobina (HBG1) è un componente dell'emoglobina fetale (HbF), un tetramero costituito da due catene alfa e due catene gamma.
• L'HbF è l'emoglobina predominante durante lo sviluppo fetale e viene gradualmente sostituita dall'emoglobina adulta (HbA) dopo la nascita. Ha un'affinità per l'ossigeno maggiore rispetto all'emoglobina adulta, facilitando il trasferimento dell'ossigeno dalla madre al feto.
• Il gene HBG1 appartiene al cluster genico della beta-globina sul cromosoma 11. Esiste un gene gamma-2 strettamente correlato (HBG2) che differisce per un solo amminoacido; la catena gamma-1 è nota anche come catena A-gamma, mentre la gamma-2 è la catena G-gamma.
• HBG1 è espresso specificamente nei globuli rossi e la sua espressione è regolata durante lo sviluppo, venendo silenziata nelle cellule eritroidi adulte, tranne che in determinate condizioni patologiche o nella persistenza ereditaria dell'emoglobina fetale (HPFH).
• La proteina è una proteina legante l'eme, essenziale per il trasporto dell'ossigeno. Contiene ferro ed è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e S-nitrosilazione, come indicato dagli studi proteomici.
• Gli studi strutturali (parola chiave 3D-structure) hanno chiarito la conformazione dell'emoglobina fetale. Il sequenziamento diretto della proteina ha confermato la struttura primaria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 1-100) di HBG1 umano. A causa dell'elevata somiglianza di sequenza con HBG2 (che differisce per un solo amminoacido in questa regione), l'anticorpo può presentare reattività crociata con HBG2. Convalidare la specificità nei sistemi di campioni pertinenti.
• Per il Western blot, si prevede una banda intorno a 16 kDa. Utilizzare controlli positivi come lisato di fegato fetale o lisato di sangue cordonale, che esprimono livelli elevati di HBG1. Assicurarsi di effettuare un corretto caricamento e trasferimento delle proteine.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo della proteina HBG1 ricombinante o dell'HbF purificata come antigene di rivestimento. La reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce la presenza di epitopi conservati, ma è necessario confermare la reattività in queste specie mediante allineamento delle sequenze ed esperimenti pilota.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati per interpretare accuratamente i risultati. Titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale nel proprio sistema sperimentale specifico.

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