Anticorpo policlonale di coniglio anti-HCFC1 per WB, ELISA - P51610

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HCFC1

• HCFC1 è un coregolatore trascrizionale che funge da proteina scaffold, mediando le interazioni tra fattori trascrizionali come THAP11 e ZNF143 e i coregolatori (PubMed:26416877). Riferimenti correlati: PMID:26416877
• È fondamentale per la progressione del ciclo cellulare, con ruoli funzionali nella transizione G1/S, come dimostrato da studi condotti utilizzando mutanti e modelli di knockdown (PubMed:10629049, PubMed:10779346, PubMed:15190068). Riferimenti correlati: PMID:10629049 PMID:10779346 PMID:15190068
• HCFC1 ancora i complessi metiltransferasi Set1/Ash2 dell'istone H3K4 e deacetilasi dell'istone Sin3, integrando l'attivazione e la repressione trascrizionale (PubMed:12670868). Riferimenti correlati: PMID:12670868
• Funziona da coattivatore per EGR2 e GABP2 e reprime l'attivazione del promotore p15(INK4b) mediata da ZBTB17, inibendo il reclutamento di p300 (PubMed:12244100, PubMed:14532282). Riferimenti correlati: PMID:12244100 PMID:14532282
• In quanto parte del complesso NSL, HCFC1 contribuisce probabilmente all'acetilazione dell'istone nucleosomale H4 su specifici residui di lisina (PubMed:20018852). Riferimenti correlati: PMID:20018852
• HCFC1 recluta KMT2E/MLL5 ai promotori responsivi a E2F1, promuovendo l'attivazione trascrizionale e facilitando la transizione dalla fase G1 alla fase S (PubMed:23629655). Riferimenti correlati: PMID:23629655
• La localizzazione subcellulare comprende sia il citoplasma sia il nucleo, in accordo con i suoi diversi ruoli regolatori.
• La proteina è ampiamente espressa, con livelli particolarmente elevati nei tessuti fetali e nel rene adulto, ed è coinvolta nelle interazioni ospite-virus, in particolare con VP16 del virus herpes simplex.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai 250 amminoacidi N-terminali di HCFC1 umano. Quando si utilizza questo anticorpo policlonale, il riconoscimento di epitopi multipli può produrre un segnale robusto, ma la coerenza tra i diversi lotti deve essere confermata per i test critici.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 209 kDa. Utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (ad es. 6-8%) e garantire un trasferimento efficiente mediante blotting in tank umido con un tempo di trasferimento prolungato. Si raccomanda di includere un marcatore ad alto peso molecolare.
• A causa dell'elevato peso molecolare, prendere in considerazione l'uso di lisati proteici freschi con inibitori delle proteasi per prevenire la degradazione e verificare l'espressione nel tessuto di interesse; i lisati di rene e di tessuto fetale possono fungere da controlli positivi.
• Secondo i dati del fornitore, l'anticorpo presenta reattività crociata con campioni di topo e ratto. Tuttavia, si raccomanda l'allineamento della sequenza della regione immunogena tra le diverse specie per garantire la reattività prevista. Eseguire la validazione con controlli appropriati.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e la concentrazione dell'anticorpo; considerare i potenziali problemi di elevato background dovuti alla natura policlonale.

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