Anticorpo monoclonale anti-HCoV-229E Spike S1 per WB, ELISA - P15423

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della glicoproteina Spike

• La glicoproteina Spike (S) del coronavirus umano 229E (HCoV-229E) è una proteina di fusione virale di classe I, essenziale per l'ingresso del virus nelle cellule ospiti.
• Viene sintetizzata come precursore e scissa proteoliticamente nelle subunità S1 e S2; la regione S1 contiene il dominio di legame al recettore (RBD), che si lega al recettore dell'ospite aminopeptidasi N (ANPEP).
• Il legame al recettore induce riarrangiamenti conformazionali che espongono il peptide di fusione S2, avviando la fusione tra l'involucro virale e la membrana della cellula ospite.
• La subunità S2 presenta regioni di ripetizioni eptadiche che si assemblano in una caratteristica struttura a trimero di forcine, favorendo l'avvicinamento e la fusione delle membrane virale e bersaglio.
• A livello subcellulare, durante l'assemblaggio del virione, la proteina Spike si localizza nella membrana del virione e nel compartimento intermedio reticolo endoplasmatico–apparato di Golgi (ERGIC) della cellula ospite.
• Le principali caratteristiche funzionali e strutturali comprendono un peptide segnale, un'elica transmembrana, domini a coiled-coil, un'estesa glicosilazione e ruoli nella virulenza, nell'interazione ospite-virus e nell'adesione virale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per l'analisi Western blot, prendere in considerazione l'uso di condizioni riducenti; la proteina Spike a lunghezza intera migra a circa 129 kDa, mentre il prodotto di scissione S1 può apparire come una banda più piccola. Validare la reattività dell'anticorpo in lisati cellulari infettati da HCoV-229E o in cellule che esprimono Spike.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione per la proteina Spike S1 di HCoV-229E; titolare la concentrazione di lavoro per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• L'anticorpo è specifico per HCoV-229E e non presenta reattività crociata con coronavirus umani filogeneticamente distinti; se necessario, confermare la selettività in pannelli multipatogeno.

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