Anticorpo policlonale coniglio anti-HCoV-OC43 Spike S2 per WB, ELISA - P36334

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della glicoproteina Spike

• La glicoproteina Spike (S), indicata anche come E2 o proteina peplomerica, è una proteina di fusione virale di classe I che decora la superficie dei virioni HCoV-OC43.
• La subunità S1 media l'attacco iniziale alle cellule ospiti legandosi ai recettori contenenti acido sialico, un determinante chiave del tropismo virale.
• Dopo il legame del recettore e l'endocitosi del virus, la subunità S2 subisce drammatici cambiamenti conformazionali; le sue regioni a ripetizione eptadica formano un trimero di capelli che guida la fusione delle membrane virali e endosomiali dell'ospite.
• Spike viene sintetizzata come precursore e scissa proteoliticamente in S1 e S2; il peptide di fusione interno all'interno di S2 viene svelato dopo la scissione, consentendo la fusione della membrana.
• Durante l'assemblaggio virale, la proteina si localizza sulla membrana del virione, sulla membrana della cellula ospite e sulla membrana del compartimento intermedio tra reticolo endoplasmatico e apparato di Golgi (ERGIC).
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata, legami disolfuro che stabilizzano la struttura pre-fusione e palmitoilazione che ancorano la proteina nel doppio strato lipidico.
• Come fattore chiave di virulenza che media sia l'attacco che l'ingresso nella cellula ospite, spike è un bersaglio principale per gli anticorpi neutralizzanti e lo sviluppo di reagenti diagnostici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Il peptide immunogeno si trova all'interno della subunità S2 (aa 782–881); pertanto, ci si aspetta che l'anticorpo riconosca sia la Spike a lunghezza intera (~150 kDa) che il prodotto di scissione S2 in condizioni riducenti.
• Per il WB, considerare l'utilizzo del lisato di cellule infette da HCoV-OC43 come controllo positivo; la glicosilazione può causare la migrazione della banda a un peso molecolare apparente più elevato.
• A causa della natura policlonale, l'anticorpo può fornire un'ampia copertura dell'epitopo nell'ELISA; tuttavia, la cross-reattività con altri coronavirus dovrebbe essere valutata empiricamente.
• Come glicoproteina transmembrana, Spike richiede detergenti appropriati per l'estrazione; evitare l'ebollizione prolungata dei campioni per prevenire l'aggregazione.

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