Anticorpo policlonale coniglio anti-HCRT per WB, ELISA - O43612

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'HCRT

• L'HCRT codifica il precursore delle neuropeptidi orexin, note anche come ipocretina, coinvolte nella regolazione del comportamento alimentare e dei cicli sonno-veglia.
• Il precursore prepro-orexina viene processato proteoliticamente per produrre due neuropeptidi attivi: orexin-A e orexin-B, che si legano con alta affinità ai rispettivi recettori HCRTR1 e HCRTR2.
• La segnalazione dell'orexina è implicata in funzioni omeostatiche più ampie, tra cui il metabolismo energetico, la regolazione autonoma, l'equilibrio ormonale e l'omeostasi dei fluidi.
• L'HCRT è espresso prevalentemente nel nucleo subtalamico, con livelli non rilevabili in altre regioni cerebrali testate e nei tessuti periferici (cuore, placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene, pancreas).
• A livello subcellulare, il precursore si localizza al reticolo endoplasmatico rugoso e viene secreto tramite vescicole citoplasmatiche ai terminali sinaptici.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono l'amidazione, la formazione di ponti disolfuro e la formazione di acido piroglutammico N-terminale, che sono critiche per l'attività delle neuropeptidi.
• Clinicamente, la disfunzione dell'HCRT è associata a varianti della malattia legate alla narcolessia e ad altri disturbi del sonno (parola chiave UniProt: Variante della malattia).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il rilevamento Western blot, considerare il peso molecolare previsto di 13 kDa; validare l'anticorpo nel proprio sistema di campione utilizzando appropriati controlli positivi da tessuto cerebrale (nucleo subtalamico) o proteina ricombinante.
• A causa dell'espressione limitata dell'HCRT, assicurare l'arricchimento del campione dal sistema nervoso centrale; i tessuti di cuore, placenta, fegato o rene possono servire come controlli negativi basandosi sui livelli non rilevati riportati.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere esplorato come reagente di cattura o rilevamento; ottimizzare empiricamente la concentrazione di rivestimento e le condizioni di blocco.
• È stata riportata reattività crociata con ortologhi di mouse e ratto; tuttavia, si consiglia l'allineamento della sequenza della regione immunogenica tra le specie per confermare la specificità.
• Considerare saggi di pre-assorbimento o competizione peptidica per confermare la specificità se compaiono bande non specifiche nel Western blot.

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