Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HDAC3 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - O15379

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HDAC3

• HDAC3 è una istone deacetilasi che rimuove gruppi acetili da residui di lisina sugli istoni core (H2A, H2B, H3, H4) e su proteine non-istoniche, contribuendo alla repressione epigenetica e alla regolazione trascrizionale.
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• Funziona all'interno di grandi complessi multiproteici come il complesso repressore N-Cor per modulare l'espressione genica e svolge un ruolo nella repressione trascrizionale mediata da BCL6 deacetilando H3K27 sugli elementi potenziatori.
  Riferimenti correlati: PMID:23911289 PMID:22230954
• Oltre che sugli istoni, HDAC3 deacetila bersagli non-istonici tra cui KAT5, MEF2D, MAPK14, RARA e STAT3, influenzando processi cellulari diversi come l'infiammazione e il ritmo circadiano.
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• Agisce anche come proteina-lisina deacilasi, rimuovendo gruppi acili come crotonile, lattile, 2-idrossiisobutirrile e isonicotinile da residui di lisina, mediando così la decrotonilazione di MAPRE1/EB1 e la delattilazione di NBN/NBS1 per regolare la riparazione del DNA tramite ricombinazione omologa.
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• Nelle cellule endoteliali, HDAC3 contribuisce all'espressione di HMOX1 mediata da NFE2L2 tramite una via dipendente da PI(3)K/mTORC2/Akt, promuovendo la sopravvivenza sotto stress ossidativo.
  Riferimenti correlati: PMID:25190803
• A livello subcellulare, HDAC3 si localizza principalmente nel nucleo e sui cromosomi, ma si trova anche nel citoplasma e nel citosol, in linea con i suoi ruoli nella regolazione della cromatina e nella trasduzione del segnale.
• È ampiamente espresso nei tessuti ed è soggetto a modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e ubiquitinazione, come indicato dalle parole chiave: Fosfoproteina, coniugazione Ubl.
• HDAC3 svolge un ruolo critico nell'orologio circadiano regolando l'ubiquitinazione di BMAL1 e le interazioni con CRY in modo indipendente dall'attività deacetilasica, e il complesso NCOR1-HDAC3 controlla l'espressione circadiana dei geni dell'orologio e dei geni del metabolismo lipidico nel fegato.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (amminoacidi 299-428) di HDAC3 umano, che è altamente conservata; considerare l'allineamento delle sequenze quando si valuta la reattività incrociata con topo, ratto e scimmia.
• Per il Western blotting, è prevista una banda attesa a ~49 kDa; validare in lisati di controllo positivo da linee cellulari ad ampia espressione (es. HeLa, Jurkat).
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunoistochimica, HDAC3 mostra tipicamente localizzazione nucleare e citoplasmatica; le condizioni di fissazione e permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione per specifici tipi cellulari o tessuti.
• L'anticorpo è compatibile con l'ELISA; si raccomandano esperimenti di titolazione per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali per ogni formato di saggio.

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