Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HDAC3 per WB, IP, ELISA - O15379

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HDAC3

• HDAC3 è un'istone deacetilasi che rimuove i gruppi acetilici dai residui di lisina sugli istoni core (H2A, H2B, H3, H4) e su substrati non istonici, svolgendo un ruolo centrale nella repressione epigenetica, nella regolazione trascrizionale, nella progressione del ciclo cellulare e nello sviluppo. Riferimenti correlati: PMID:21030595, PMID:21444723, PMID:23911289

• Opera all'interno di grandi complessi multiproteici come il complesso repressore N-CoR, che attiva la sua attività deacetilasica, e partecipa alla repressione trascrizionale mediata da BCL6 deacetilando H3K27 sugli elementi enhancer. Riferimenti correlati: PMID:23911289, PMID:22230954

• Regola sia le fasi di attivazione che di repressione dell'orologio circadiano in modo indipendente dall'attività deacetilasica, coinvolgendo l'ubiquitinazione di BMAL1 e l'interazione CRY1/BMAL1 (Per similarità).

• Contribuisce alla sopravvivenza delle cellule endoteliali sotto stress ossidativo attivando la trascrizione di HMOX1 tramite l'isoforma 1 di XBP1 e una via di segnalazione dipendente da PI(3)K/mTORC2/Akt. Riferimenti correlati: PMID:25190803

• Deacetila una gamma di proteine non istoniche, tra cui KAT5, MEF2D, MAPK14, RARA e STAT3, estendendo così le sue funzioni regolatorie oltre la cromatina. Riferimenti correlati: PMID:15653507, PMID:21030595, PMID:21444723

• Agisce come corepressore di RARA, mediandone la deacetilazione e inibendo il legame con l'elemento DNA RARE; coinvolto nella risposta infiammatoria reprimendo l'espressione di microRNA-10a. Riferimenti correlati: PMID:28167758

• Funziona inoltre come deacilasi proteina-lisina, in grado di rimuovere gruppi crotonil, lactoil, 2-idrossiisobutil e isonicotinil; catalizza la decrotonilazione di MAPRE1/EB1 e la delattoilazione di NBN/NBS1, quest'ultima inibendo le rotture del doppio filamento di DNA tramite ricombinazione omologa. Riferimenti correlati: PMID:28497810, PMID:29192674, PMID:34608293, PMID:38961290

• Si localizza principalmente nel nucleo ma si trova anche nel cromosoma, nel citoplasma e nel citosol; è ampiamente espresso nei tessuti. Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, e lo splicing alternativo genera più isoforme.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 329–428 di HDAC3 umano; considerare di confermare la specificità dell'anticorpo nel proprio modello sperimentale utilizzando controlli appropriati.
• Le applicazioni validate includono Western blot (WB), immunoprecipitazione (IP) ed ELISA. Il peso molecolare previsto è di 49 kDa; ottimizzare le condizioni di elettroforesi su gel e trasferimento per il WB.
• Si osserva reattività crociata con campioni umani, di topo e di ratto, suggerendo un riconoscimento conservato dell'epitopo; verificare le prestazioni in altre specie se necessario.
• Per l'IP, titrare la concentrazione dell'anticorpo e includere controlli negativi e positivi appropriati per garantire la specificità del pull-down.
• Data l'associazione di HDAC3 con vari complessi corepressori, questo anticorpo può essere adatto per studi di co-immunoprecipitazione per analizzare le interazioni proteina-proteina.

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